老挝柯拉斯那沉香中2-(2-苯乙基)色酮类化学成分及生物活性研究

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沉香,因在水中沉,具有香味而得名。其为瑞香科(Thymelaeaceae)沉香属(Aquilaria)植物或者拟沉香属(Gyrinops)植物受外力迫害(雷劈、虫蛀、火烧等)后所产生的含有树脂的芯材。沉香分布范围较广,主要包括老挝、中东、柬埔寨、中国、缅甸、日本等地。沉香因其在医药、香水、文化等方面的广泛应用而具有巨大的市场价值。然而,野生沉香资源由于形成缓慢、产量低、市场需求大而面临枯竭。目的:研究老挝野生柯拉斯那沉香中2-(2-苯乙基)色酮类化学成分,并在此基础上对其提取分离出的单一化合物进行活性筛选。以期得到更多结构新颖且具有生物活性的单体化合物,丰富野生柯拉斯那沉香的化合物化学结构和生物活性的多样性。方法:1.本研究采用多种硅胶柱色谱技术、分析型、半制备型HPLC(C18柱、C8柱、苯基柱、萘环柱等)、薄层色谱等多种方法进行单体化合物分离。2.采用多种波谱方法(1D NMR、2D NMR、IR、UV、HR-ESI-MS、OR、CD计算)及使用文献波谱数据比对,同时,结合单体化合物自身的呈点性、熔点性等物理化学性质来进行鉴定。3.对粗提物及分离得到的单体化合物进行细胞毒活性、酪氨酸酶抑制活性测试。结果:1.从老挝野生柯拉斯那沉香乙酸乙酯萃取物中共分离鉴定了24个单体化合物。其中包括10(1~10)个新化合物和14个已知化合物。化合物1~3、11~21为Fidersia型2-(2-苯乙基)色酮;化合物4~7、9~10、22~24为5,6,7,8-四氢-2-(2-苯乙基)色酮;化合物8为2-(2-苯乙基)色酮二聚体。化合物1~12、和15~24均为首次从柯拉斯那所得沉香中分离得到。本研究分离得到的化合物9和10含乙酰基的2-(2-苯乙基)色酮类化合物,含乙酰基取代的四氢2-(2-苯乙基)色酮在柯拉斯那沉香中还是首次发现。24个单体化合物分别鉴定为:6-甲氧基-2-[2-(2’-羟基苯基)乙基]色酮(1)、5,6-二羟基-2-(2-苯乙基)色酮(2)、6-甲氧基-2-[2-(3’-羟基苯基)乙基]色酮(3)、6,7-顺式-二羟基-5,6,7,8-四氢色酮-2-(4-甲氧基苯基)乙基)色酮(4)、(5R,6S,7S,8R)-5,6,7-三羟基-8-甲氧基-5,6,7,8-四氢-2-(2-(4-甲氧基苯基)乙基)色酮(5)、rel-(5S,6R,7R,8S)-8-氯-5,6,7,8-四氢-5,6,7-三羟基-2-[2-(4-甲氧基苯基)乙基]-4H-1苯并吡喃-4-酮(6)、(6S,7S,8R)-6,7-二羟基-8-氯-5,6,7,8-四氢-2-(3-羟基-4-甲氧基苯基)乙基)色酮(7)、3′-Hydroxyaquisinenone D(8)、5β,6β,7β-三羟基-8α-乙酰基-2-(2-苯乙基)-5,6,7,8-四氢色酮(9)、5β,6β,7β-三羟基-8α-乙酰基-2-[2-(4-甲氧基苯基)乙基]-5,6,7,8-四氢色酮(10)、5-甲氧基-6-羟基-2-[2-(4’-甲氧基苯基)乙基]色酮(11)、5-甲氧基-6-羟基-2-(2-苯乙基)色酮(12)、6-甲氧基-2-[2-(3’-甲氧基-4’-羟基苯基)乙基]色酮(13)、6-甲氧基-2-[2-(3’-羟基-4’-甲氧基苯基)乙基]色酮(14)、6-甲氧基-7-羟基-2-[2-(4’-甲氧基苯基)乙基]色酮(15)、6,7-二甲氧基-2-[2-(3’-羟基-4’-甲氧基苯基)乙基]色酮(16)、6,7-二甲氧基-2-[2-(4’-甲氧基苯基)乙基]色酮(17)、5-羟基-2-[2-(2’-羟基苯基)乙基]色酮(18)、6-羟基-2-[2-(4’-羟基苯基)乙基]色酮(19)、5-甲氧基-6-羟基-2-[2-(3’-羟基-4’-甲氧基苯基)乙基]色酮(20)、5-羟基-6-甲氧基-2-[2-(3’-羟基-4’-甲氧基苯基)乙基]色酮(21)、Agarotetrol(22)、5α,6β,7β,8α-四羟基-2-[2-(4-甲氧基苯基)乙基]-5,6,7,8-四氢色酮(23)、Tetrahydrochromone F(24)。2.对部分化合物进行细胞毒活性测试,活性结果表明化合物2、5、13、21对人慢性髓原白血病细胞(K562)有较弱的活性,化合物2表现出中等抑制活性,IC50值为28.51±0.14μM,其余活性较弱。化合物7对人宫颈癌细胞(Hela)具有较弱的细胞毒活性,IC50值为49.82±1.20μM。对分离得到的2-(2-苯乙基)色酮类化合物进行了酪氨酸酶抑制活性测试,结果显示,化合物2,13,15,16,17具有一定的酪氨酸酶抑制活性(抑制率20%-55%之间,样品浓度100μM)。其中化合物2的活性较好,IC50值为172.6±1.7μM(阳性对照:曲酸,46.1±1.3μM)。结论:本研究继续对柯拉斯那沉香进行化学成分研究,得到多个结构新颖的活性单体化合物,为市场上人工和野生柯拉斯那沉香的开发和利用提供科学依据,也为人工沉香的质量评价提供参考。
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