无花果多糖抗氧化活性研究

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近年来,研究人员发现水果蔬菜中存在着多种抗氧化成分,其摄入量与预防疾病、延缓衰老之间存在着密切联系,所以植物活性成分的抗氧化特性研究越来越受到广大学者的关注。无花果是世界上最古老、也是人类最早栽培的果树之一,具有很高的营养价值。无花果多糖是无花果中的主要活性成分之一,已有不少研究报道指出无花果多糖具有抗肿瘤、增强免疫力等作用,但有关无花果多糖抗氧化活性的研究仍是个空白,国内外尚未见报道。本研究以无花果为原料,探讨了无花果多糖(FCPS)及其纯化和辐照降解后抗氧化活性的变化。主要研究工作与结论如下:采用不同极性的溶剂正己烷、乙酸乙酯、正丁醇和水分别对无花果进行提取,通过四种不同体系(超氧负离子、羟自由基、还原能力、DPPH·)研究了无花果不同提取物的抗氧化活性,并测定了不同提取物的总酚含量。结果表明所有的提取物都具有一定的抗氧化活性,而且随着浓度的增加其抗氧化能力也相应增加。其中水提取物清除超氧负离子的IC50为2.81mg/mL,其清除能力高于其他提取组分。水提取物也表现出了较好的清除羟基自由基的能力。在DPPH·体系中,水提取物的IC50为0.724mg/mL,乙酸乙酯提取物的IC50为1.435mg/mL,而正丁醇提取物IC50为2.071mg/mL,可知水提取物的清除DPPH·能力较好。还原能力测定中,各提取物浓度为4mg/mL时,正己烷、乙酸乙酯、正丁醇和水提取物的吸光度值分别为0.49、0.56、0.25和0.58,可见水提取物具有较高的还原能力活性。在总酚测定中,水提取物同样具有最高的含量,为12.5±0.49mg/g提取物。由初步实验结果可知,在无花果的四种提取物中,水提取物表现出较高的抗氧化活性。通过乙醇沉淀无花果水提取物制得无花果粗多糖。对粗多糖进行分离纯化得到无花果多糖(FCPS)后,对其理化性质、得率、含量、分子量分布和单糖组成及抗氧化活性进行了分析。FCPS得率为4.1%,总糖含量91%,分子量在5.92×105~2.0×106之间,单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,其摩尔比为1.93:3.86:0.46:0.55:7.42:2.87。水溶液中,FCPS的等当点为6.92。FCPS清除超氧负离子的IC50=0.62mg/mL(水提物:IC50=2.81mg/mL,Vc:IC50=0.32mg/mL)和清除DPPH·能力为IC50=0.61mg/mL(水提物:IC50=0.724mg/mL,Vc:IC50=0.01mg/mL)与水提物相比都具有较好的清除超氧负离子活性和清除DPPH·能力。FCPS和Vc清除羟基自由基的IC50分别为4.78mg/mL和0.62mg/mL;浓度为4mg/mL时,FCPS和水提物的羟基自由基清除率分别为43.4%和31%,相应的还原能力分别为0.348和0.58。结果表明,无花果多糖除还原能力测试外,其余所测抗氧化能力都高于水提物,但都较差于Vc的活性。无花果多糖进一步经DEAE-52纤维素柱纯化,得到三个无花果分级组分FCPS 1、FCPS 2和FCPS 3,分别经过高效凝胶色谱分析后,确定FCPS 2为单一的多糖组分,并对其进行了抗氧化活性分析。FCPS 2清除超氧负离子和清除羟基自由基的IC50分别为0.43mg/mL和1.0 mg/mL,比较于FCPS的0.62mg/mL和4.78 mg/m有显著提高。但在还原能力上,FCPS 2远低于FCPS。进行了FCPS的辐照降解实验研究,发现辐照剂量、溶液pH值和溶液浓度都会影响无花果多糖的降解程度,即随着辐照剂量和溶液pH值的增大,无花果多糖的降解程度增加;无花果多糖浓度降低,其辐照降解程度加大。采用紫外可见光谱和红外光谱研究了辐照对无花果多糖结构的影响,实验结果发现辐照后多糖中生成C=O,而且生成部分-COO-。抗氧化研究发现:经剂量为20kGy、50kGyCo-60辐照后,FCPS清除超氧负离子的IC50分别约为4.2μg/mL和3μg/mL;清除羟基自由基的IC50分别约为0.075mg/mL和0.1mg/mL;当FCPS浓度为30μg/mL时,其还原能力分别为0.42、0.32,表明辐照后的无花果多的抗氧化活性有所提高。
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