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青藤碱是从中药青风藤中提取的生物碱单体，用于治疗类风湿性关节炎等各种风湿病以及心律失常取得较好疗效。脂质体是新型的靶向给药制剂，具有靶向，长效释药的特点，且其制备的膜材为天然高分子材料，无毒，可在体内生物降解。将青藤碱的盐酸盐制成脂质体制剂，使其在病灶靶向释放，可以达到减少给药量从而减少青藤碱全身过敏反应，提高用药安全性的目的。本课题主要进行青藤碱脂质体的研究。 目的 1．建立盐酸青藤碱的紫外分析方法。 2．建立盐酸青藤碱脂质体的体外分析方法。 3．研究分离脂质体和测定包封率的方法。 4．研究比较盐酸青藤碱脂质体的制备方法。 5．建立盐酸青藤碱脂质体的质控指标。 方法 1．建立盐酸青藤碱的紫外分析方法。对盐酸青藤碱的磷酸盐缓冲液（PBS）作光谱扫描，确定测定波长为263nm，制备了盐酸青藤碱PBS溶液的标准曲线并进行方法学考察。 2．比较三种分离及测定脂质体包封率的方法。考察盐酸青藤碱PBS溶液及空白脂质体在透析袋中的透过行为，在葡聚糖凝胶层析柱上的流出行为，及在凝胶微型柱上的截留行为。并用三种方法分别测定了盐酸青藤碱脂质体的包封率。 3．建立青藤碱脂质体（HCSN-LIP）的紫外分析方法。采用均匀设计法研究比较影响脂质体中盐酸青藤碱提取率的因素，并优化出最佳提取工艺。 4．进行薄膜法制备HCSN-LIP的研究。采用均匀设计法以包封率和载药量为考察指标优化最佳制备工艺。考察了投药量对载药量的影响，稀释倍数对包封率的影响。 5．进行逆相蒸发法制备HCSN-LIP研究。采用均匀设计法以包封率和载药量为考察指标优化最佳制备工艺。 6．进行pH梯度法制备HCSN-LIP的研究。并与相应的传统方法作比较。 7．从外观，显微，电镜等方面研究HCSN-LIP的质量；以单位容积载药 月 t－＾bstroCt量为指标监控H种 HCSN－LIP的质量。 8．研究三种HCSN－LIP在生理盐水中的体外释放度，并以各种释放度方程对累积释放百分率进行拟合得出各自最适用的释放度方程，求出释放半衰期。 9．研究三种1K洲－LIP对温度，m，及贮存的稳定性。 结果 1．盐酸青藤碱PBS 溶液测定波长为 2631。11。，标准曲线为＊－13．＊X＋0＊刀＊6（＊－0．＊9＼检测限为0刀016fllg八 2．盐酸青藤碱在 3000D A析袋中＊ 。r透过率为 76．3O；空白脂质体在透析3hr后可被检出。盐酸青藤碱在 SCpl诅dexG25层析柱第 15ml开始被洗脱至 45nil洗脱完全；空白脂质体从第3ml至第12ml被洗脱；微柱－离心法对盐酸青藤碱有一定的截留容量和浓度限度。所有供试液在第0．3－0．6ml流分中被洗出。上样量上限为0．llnl，浓度为0．128mg／ml． 3．盐酸青藤碱脂质体中盐酸青藤碱的最佳提取方法为含醇量为65％，冷藏23小时，贪。转速为4000rpm加in，吸取上清液在263urn处测定。甲醇处理法对PBS溶液中的盐酸青藤碱有很好的提取率，但未能消除脂质成分的干扰，困而回收提取率不高。氯仿或丙酮草取可较好地消除千扰，后者提取率偏低。因此青藤碱脂质体也可用碱化后氟仿革取作为含量测定中的提取方式。醇沉法不使用有毒及腐蚀性试剂，不必用氮气吹干，操作简单，适用于青藤碱脂质体的体外分析。氯仿苹取提取效率高，安全性及简便不及醇沉法，但溶剂可浓缩，困而比醇提取法有更宽的检测限，适用于青藤碱脂质体的体内分析． 4．薄膜法制备HCSN一二IP 得到包封率的二次多元回归方程：Y二115．390if刀60242X2上．29if5X3．2二63278X／＋l．4604484E－02X32＋1．553275E．03XIX3＋O．3063刀8x2x3＋3．852057B02X3x5（’－0．9999，F－5055．751）据此优化出卵磷脂，胆固醇的最佳配 匕，氯仿溶解，在ZIC水浴下旋转制膜，加入含 40mg盐酸青藤碱的 PBS溶液雇 37’C －F孵育10hf。得到载药量的多元回归方程 Y4＝0．7477337·3＊25974E－03XI＋20000iE－02X2－8．522729E－03X3－5．30303－03X4＋6＊66664E－3X。（－0．865 1626，F－2．380995）认为除各考察因素外，投药量等其它因素对载药量有影响。稀释到50倍脂质体包封率降低． 5．逆相蒸发法制备HCSN－LIP，可得到包封率的二次多项式回归方程式：YSs58．7385．29．46033X2．11．58718X3十4．859714E．02X12十1刀56006X32 ．2． 4 t－AbstrO。t十0．0477229X；X。（ 二0．9997，F一331．3474）优化 出卵磷脂，月固醇最佳配》，溶于氯仿中，加入含盐酸青藤碱PBS溶液，以逆相蒸发法制备． 6．pH梯度法制备HCSN干IP，包封率t匕较高的工艺是薄膜法制膜后以叫－4的拘橡酸水化，成脂质体，加入 Na刃PO。调外水相至 pH刀再加盐酸青藤碱的PBS溶液 65 C T孵育 20分钟。 7．显微及电镜现察