应用RNAi技术对大肠癌ECGF1基因生物功能的研究

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大肠癌在西欧、北美等发达国家是最为常见的恶性肿瘤,在我国也是十大肿瘤之一。与其他国家相比,我国的大肠癌的死亡率处于较低的水平。但近20年来,世界范围内恶性肿瘤的构成比发生了一定的变化,某些肿瘤如宫颈癌的死亡率有所下降,而大肠癌的死亡率呈明显的上升趋势。70年代初上海市大肠癌为恶性肿瘤的第6位,80年代上升到第4位。我国各地区的资料表明大肠癌的发生率均有不同程度的上升。另外,我国青年人(<30岁)的发病率远较国外多见,因此,如何预防其发生及早期发现方面的研究,特别是实验研究更是我们医生应该从事的一项任务。除此之外,关于大肠癌肝转移的诊治问题也是外科医生棘手的问题。将外源性或内源性双链RNA(double-strand-RNA,dsRNA)导入细胞后引起与该段RNA同源的mRNA产生特异性降解,其相应的基因受到抑制这种发生在转录后的基因静寂(post transcription gene silencing,PTGS)现象。被称之为RNA干扰(RNAinterference,RNAi)RNAi普遍存在于自然界中,1998年Fire等将dsRNA注射到秀丽新线虫(C.elegans)体内,能高效、特异地阻断相应基因的表达,其抑制效率比纯化后的反义RNA至少要高2个数量级,随后发现在各种生物如拟南芥菜、果蝇、真菌、小鼠胚胎细胞以及哺乳动物细胞中,均存在RNAi现象随着研究的不断深入RNAi在基因功能研究,细胞遗传学以及人类疾病的基因治疗等方面将有着潜在的巨大应用价值。血小板衍化内皮细胞生长因子PD-ECGF/TP即ECGF1是从血小板中分离纯化得到的具有血管新生作用的多肽,分子量为55KD,体内常以110KD的二聚体形式存在,其cDNA为1.8Kb,基因位于22号染色体上,在4.3Kb的基因序列段上共有10个外显子,翻译始密码位于第2外显子,终止密码位于第10外显子上,启动子内缺乏真核细胞中常有的TATA和CCAAT盒序列,但转
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