以HBcAg-preS1表位融合蛋白为基础的新型HBV治疗性疫苗的构建、表达和免疫活性研究

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乙肝是一种严重威胁人类健康的传染病,目前临床治疗仍没有特效药物。许多研究证实,细胞免疫和体液免疫在阻止HBV感染和病毒清除方面起到了关键的作用。因此,开发能特异增强机体细胞免疫和/或体液免疫的乙肝治疗性药物是该领域研究的热点。乙肝核心抗原(HBcAg)由于其独特的物理结构和免疫学性质而被人们认为是一种良好的分子载体。本研究利用基因工程技术对HBcAg基因e1区进行了修饰,使其变为能够良好递呈外源基因的分子载体。将前S1表位基因插入该区,构建了含有HBcAg和前S1表位融合基因的原核表达载体pBTcs1。在大肠杆菌中表达后,融合蛋白BTcs1经蔗糖密度梯度超速离心纯化。蛋白鉴定结果显示,融合蛋白BTcs1分子量约为28 kDa,能够与抗-preS1抗体和抗-HBc抗体特异杂交,且能够自主组装成病毒样颗粒(VLPs)结构,颗粒直径约为30-34 nm。融合蛋白BTcs1免疫Balb/c小鼠后,能够诱导出高滴度的保护抗体和Th1型免疫反应,表明BTcs1可能发展成为一种兼有预防和治疗作用的新型HBV疫苗。
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