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青梗菜是小白菜中的一类叶片亮绿、束腰、品质优良的品种,在我国南北各地广泛种植,也是日本和韩国的主栽小白菜品种类型。青梗菜许多形态性状表现数量性状的遗传特征,分子标记技术的发展为数量遗传学研究提供了有力工具。基于分子标记构建的分子遗传图谱,能有效地应用于数量性状的基因定位和分子标记辅助育种。本项研究利用小孢子培养技术创制青梗菜DH系为作图群体,构建永久性分子遗传图谱,对重要农艺性状进行QTL分析,以期为青梗菜品种改良中重要农艺性状分子标记辅助选择奠定基础。主要研究结果如下:以18个青梗菜品种为试材进行小孢子培养,分析了胚状体发生和发育、植株再生、再生植株继代及生根的影响因素,探讨了小孢子植株倍性鉴定方法。不同基因型试材间的小孢子胚胎发生能力有很大差异,‘YS07’胚诱导率最高,达到了24.00个/蕾,‘YS12’没有诱导出胚状体;33℃高温预处理对小孢子胚胎发生是必要的,处理时间以24h为宜;不同品种适宜添加浓度和配比有所差异,’0.05mg·L-16-BA+0.1~0.2mg·L-1NAA’效果最好;振荡培养可以改善提高胚状体诱导率,促进小孢子胚状体发育,增加子叶形胚比率,进而提高成苗率,同时振荡培养还加快了胚状体的发育速度,提高胚发育的同步性,使培养时间缩短1-4天;成苗率与胚状体发育时期关系密切,发育成熟的胚状体成苗率远高于发育不完全的胚;琼脂含量为1.0%的培养基既能满足胚状体萌发所需要的干燥环境,又能保证胚萌发所需的水分,还能有效的防止玻璃化问题,是青梗菜小孢子培养较适合成苗的培养基;适当增加培养基中蔗糖的浓度可以降低玻璃化苗的发生率,适宜的蔗糖浓度为3%;培养基中加入一定量的活性炭可以提高小孢子胚的成苗率,适宜的添加浓度为100mg·L-1;小孢子植株生根培养以’1/2MS+NAA0.1mg·L-1+3%蔗糖+1.0%琼脂’培养基为宜,生根率可达到94.33%,移栽成活率可达到83.62%。试验获得的1070株小孢子植株,单倍体占18.22%,双单倍体占59.81%,高倍体占24.95%,嵌合体占3.83%。利用由青梗菜两个自交系配成的杂交组合YS06(705-1×705-2)进行小孢子培养得到的182个DH系构成的做图群体,应用SSR和SRAP两种标记构建遗传连锁图谱,得到1张分子遗传图谱。该图谱总长度995.3cM,包括10个连锁群、143个多态性分子标记,平均距离7.0cM。通过SSR锚定标记将本图谱与芸薹属A基因组参照连锁图的10条染色体一一对应起来。连锁群数目与染色体数相等,连锁群编号与A基因组参考图谱相对应,从A01到A10。10个连锁群中最长的连锁群为A03(173.5cM),最短为A04(59.9cM)。分子标记在连锁群上的分布比较均匀,构成图谱的标记中,共有43个表现出不同程度的偏分离,在各个连锁群均存在偏分离现象,偏分离标记比率为30.07%。利用构建的遗传连锁图谱,对群体中分离的青梗菜形态性状进行QTL分析。控制13个形态性状的QTL主要定位在5个连锁群上,共检测到33个QTL。株高的QTL在10个连锁群上检测到2个,开展度的QTL只检测到1个,菜头直径在A03连锁群上检测到1个QTL,菜腰直径也只检测到1个QTL,叶长发现了4个QTL位点,叶柄长检测到7个QTL位点,叶柄宽度的2个QTL,与叶宽相关的3个QTL位点位于A05和A09连锁群上,柄厚在A02连锁群上检测到1个QTL,叶片数检测到3个QTL位点,单株重检测到3个QTL位点,共检测到2个控制叶片重量的QTL,叶柄重量在A02、A03和A09连锁群上分别检测到3个QTL位点。控制形态性状的QTL常常聚集在同一连锁群上同一标记区间或相近的位点上,这与性状间表型性状相关系数很高相一致。检测到控制叶色和叶柄色的QTL共计28个。利用色差计测量,控制叶片L*值的QTL有5个,控制叶片a*值的QTL有3个,控制叶片b*值的QTL有6个;目测仅发现2个叶色相关QTL。利用色差计对叶柄色泽测量,检测到柄色L*值的QTL有4个,对于柄色a*值检测到的QTL有3个,控制柄色b*值检测到3个QTL;目测叶柄色泽发现2个QTL。分析发现控制色泽相关性状也存在QTL的密集区,标记与QTL位点紧密连锁。上述性状可以用与其连锁的单标记进行辅助选择。