研究目的: 血吸虫病是一种严重危害人类身体健康和生命安全、阻碍疫区经济发展和社会进步的人兽共患病。血吸虫病病情的控制一直是我国政府面临的公共卫生难题。历史经验表明,疫苗的成功应用是控制和消灭一些重要传染性疾病最为经济、有效的途径之一。本课题组多年来的研究结果表明，来源于日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原(SIEA)的26-28kda天然分子是诱导宿主产生抗卵胚发育及抗雌虫生殖免疫效果的主要成分。由本室研制的1号疫苗(主要组分为SIEA26-28kda)在全国16种日本血吸虫疫苗统一考核中，获得了最佳的动物保护效果。目前，我室在SIEA26-28kda的研究方面已积累了丰富的实验资料，但对SIEA26-28kda天然分子抗原的生化特性如抗原的组成、分子特性及其编码基因、序列等研究仍在进一步研究之中。本研究采用RP-HPIC定量分析以及一、二级质谱等技术等,对SIEA26-28kda天然抗原组分进行更深入研究，为进一步研制SIEA26-28kda天然分子多价疫苗，筛选其具有保护性抗原表位的特定有效片段并进行重组表达提供重要的实验依据。 研究方法: (1)通过SDS-PAGE和RP-HPLC对SIEA及SIEA26-28kda进行分离纯化和定量分析;(2)选取SIEA26-28kda的RP-HPLC单一峰作为样品,以Edman降解法进行氨基酸序列分析(3)对SIEA26-28kda 2-DE丰度最大的蛋白点进行肽质量指纹图谱分析;(4)对硫氧化还原蛋白过氧化物酶进～步进行二级质谱分析与鉴定。 研究结果: (1) 采用SDS-PAGE对SIEA进行分离纯化与分析,获得电泳纯SIEA26-28kda,凝胶成像系统分析显示,其含量占SIEA的4.5[％]:SIEA26-28kda通过RP-HPLC分离纯化后得到了23个洗脱峰(主峰为3个，含量最高者占71.0[％]),各组分的相对含量分布于0.1[％]至71.0[％]之间。 (2)SIEA经IPG-Dalt双向凝胶电泳分离后，在SIEA26-28kda区段有3个深染的蛋白斑点,丰度最大的蛋白斑点(SIEA26-28kda-2-DE-23)经酶解后进行肽质量指纹图谱分析，结果表明，该蛋白斑点与硫氧化还原蛋白过氧化物酶-3(Tpx-3)匹配。 (3)通过串联质谱分析确认，SIEA含有硫氧化还原蛋白过氧化物酶(TPx)家族的其他成员。 结论: SIEA26-28kDa天然分子抗原组成较为复杂，但主要成分不多，硫氧化还原蛋白过氧化物酶(TPx)是其中的主要成分之一，是血吸虫赖以生存的酶。本研究结果首次证明TPx为SIEA26-28kDa抗原组分中主要成分。二级质谱进一步分析鉴定，发现SIEA中存在多个硫氧化还原蛋白过氧化物酶(TPx)蛋白家族的成员，该研究为抗日本血吸虫病天然分子多价复合疫苗的研制提供了重要的实验依据。