RNA干扰沉默缝隙连接蛋白43对泌乳素腺瘤中垂体瘤转化基因表达的影响

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目的本课题探讨在雌二醇诱导的泌乳素腺瘤中,沉默Cx43基因的表达对大鼠垂体肿瘤转化基因(PTTG)表达及垂体肿瘤增殖发展的影响。方法采用雌二醇诱导大鼠泌乳素腺瘤模型。正常组不接受任何药物处理;单纯雌二醇组肌肉注射雌二醇;雌二醇+RNA干扰组于注射雌二醇10周后,经蛛网膜下腔注射Cx43 RNA干扰病毒;单纯RNA干扰组仅接受Cx43 RNA干扰病毒的注射。免疫荧光检测垂体Cx43的表达分布,观察垂体的质量和组织形态学变化,RT-PCR及Western Blot分别检测Cx43和PTTG的RNA及蛋白表达。结果1.沉默Cx43基因对垂体大体及细胞形态学的影响:垂体大体和细胞形态学变化在雌二醇诱导下表现为异常增生肥大,但其可被Cx43基因的沉默所逆转。提示沉默Cx43表达后,能明显抑制大鼠垂体肿瘤的增殖发展。2.沉默Cx43基因,垂体Cx43的表达分布:免疫荧光显示,雌二醇诱导Cx43表达分布增多,但这种趋势被Cx43 RNA干扰逆转。3.沉默Cx43基因,Cx43和PTTG的RNA及蛋白表达的变化:与单纯雌二醇组比较,雌二醇+RNA干扰组的Cx43和PTTG的RNA及蛋白表达水平均降低;雌二醇+RNA干扰组Cx43和PTTG的RNA及蛋白表达水平仍高于正常组和单纯RNA干扰组,但仅Cx43的RNA及蛋白差异有统计学意义。结论垂体泌乳素细胞中Cx43的表达受到抑制后,PTTG的表达同时可被抑制,最终抑制大鼠垂体泌乳素腺瘤的生长。
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