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目的:探讨血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导大鼠系膜细胞(GMC)增殖与细胞外基质分泌的影响,并初步了解Ang-(1-7)的作用受体。方法:将生长在96孔培养板上无血清静止培养24h的大鼠GMC培养液,按以下分组加入不同干扰因素进行实验。①对照组:GMC培养液中不加干扰因素;②AngⅡ组:加入AngⅡ10-7mol/L;③Ang-(1-7)组:加入Ang-(1-7)10-6mol/L;④Ang-(1-7)+AngⅡ组:在加入AngⅡ10-7mol/L的基础上,分别加入Ang-(1-7)10-6mol/L;Ang-(1-7)10-7mol/L;Ang-(1-7)10-8mol/L;Ang-(1-7)10-9mol/L;⑤AngⅡ受体1(AT1受体)拮抗剂[Sar1,Ile8]-AngⅡ+Ang-(1-7)组:先用[Sar1,Ile8]-AngⅡ(10-6mol/L)预处理30分钟后,再加入Ang-(1-7)10-6mol/L;⑥血管紧张素II受体2(AT2受体)拮抗剂PD123319+Ang-(1-7)组:先用PD123319(10-5mol/L)预处理30分钟后,再加入Ang-(1-7)10-6mol/L。每组设6个复管,放入培养箱中孵育48小时。通过3[H]-Thymidine及3[H]-Leucine掺入分别测定GMC的DNA、蛋白质合成:按上述分组加入不同干预药物的同时,在96孔板加入37kBq3[H]thymidine共同培养24h,移去培养液并用预冷的100g/L三氯乙酸于4℃固定30min,然后用平衡盐溶液洗2次,最后用10g/LSDS 0.1mol/L NaOH溶液0.1mL裂解细胞,37℃放置过夜,收集细胞裂解液至有闪烁液的测量杯中,摇匀放置待其溶解后于FJ-2107P液体闪烁仪测定放射性核数计数率(cpm/Well)。用3[H]Leucine代替3[H]thymidine,进行蛋白质合成的测定;用结晶紫染色的方法检测细胞数