杜氏盐藻硝酸盐还原酶缺陷型突变株的功能

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本文对杜氏盐藻硝酸盐还原酶缺陷型突变株的功能进行了研究。结果表明:真核表达载体p7NBT的构建利用改进的SOEing法扩增出了特异的约1700bp的融合片段;提取转化盐藻总RNA,RT-PCR扩增得到约550bp的目的片段,测序结果证实为bar基因序列;现有的三株杜氏盐藻NR缺陷型突变株经硝酸盐诱导后均未检测到NR活性;NR基因在杜氏盐藻基因组中应以单拷贝形式存在;经硝酸盐诱导后,杜氏盐藻NR活性明显提高,3d时达到最大;而NH4<+>组及无氮源组的活性一直为零;真核表达载体pMDDCA-NR的构建不同酶切分别鉴定重组质粒pMDDCA-NR插入片段大小、方向均正确。
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