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铝毒被认为是酸性红壤当中限制作物生长的主要环境因子之一。栝楼药食两用的特性使其市场需求不断扩大。而栝楼在南方酸性红壤地区的推广种植,铝毒对其生长影响不容忽视。因此,本文利用溶液培养法,研究外源水杨酸(SA)对栝楼铝胁迫的缓解作用。以筛选出的耐铝性品种安国栝楼和铝毒敏感品种浦江栝楼为实验材料,研究不同浓度外源SA对铝胁迫下栝楼生理生长、叶绿素含量及其荧光特性、抗氧化酶活性、细胞壁多糖、根系分泌特性的影响。另外,利用ISSR分子标记技术研究栝楼品种间的遗传多样性及其与栝楼耐铝性之间的关系。研究结果如下: 1.研究在Al胁迫下,不同浓度水杨酸对2个栝楼品种的生长特性、叶绿素荧光特性及抗氧化酶活性、MDA和紫外吸收物含量的影响。结果表明,经过800μmol/LAl处理15 d后,安国栝楼和浦江栝楼的相对根长、株高及地上部鲜重、叶绿素含量、最大光能转化效率(Fv/Fm)、最大荧光产量(Fm)及电子传递速率(ETR)明显下降,SOD、CAT活性却出现2种相反的变化趋势,显示出2个栝楼品种的耐铝性差异,POD活性和紫外吸收物含量降低,MDA含量及初始荧光(F0)升高。10,30,50μmol/L外源SA可不同程度地降低MDA含量及初始荧光(F0),提高栝楼的相对根长、株高、地上部鲜重、叶绿素含量及叶绿素荧光的相关指标和抗氧化酶活性。由此可知,外源SA通过提高栝楼抗氧化酶活性及光合作用能力增强栝楼抗铝毒能力。由隶属函数分析得出,SA具有缓解铝胁迫的效果,但并不能消除铝胁迫对栝楼生长的抑制作用。 2.研究外源SA对铝胁迫下栝楼根尖相对铝含量及根尖铝的荧光特性、果胶甲基酯酶(PME)、酸性磷酸酶(APA)、根尖果胶、半纤维1和半纤维素2含量的影响。结果显示,在铝胁迫下,APA和PME活性有所增强,且根尖相对铝含量、果胶、纤维素1、纤维素2含量及根尖细胞壁铝的荧光强度均增加。与安国栝楼相比,浦江栝楼表现出更高的酶活性和细胞壁多糖含量。此外,浦江栝楼根尖细胞壁果胶、纤维素1及纤维素2含量增幅较大,显示铝敏感性。铝毒引起细胞壁果胶含量增加及PME活性升高,游离羧基位点增加,与铝离子的结合能力增强。不同浓度外源SA可有效降低酶活性及细胞壁多糖含量,且随着外源水杨酸浓度的增加,酶活性及细胞壁多糖含量呈下降趋势。由此说明,SA具有缓解铝胁迫的作用。 3.研究外源水杨酸对铝胁迫下栝楼柠檬酸合酶、苹果酸脱氢酶及根系分泌物的影响。铝胁迫使安国栝楼和浦江栝楼中柠檬酸合酶和苹果酸脱氢酶活性升高,且使根系分泌物中柠檬酸、苹果酸和草酸含量升高,且柠檬酸含量远高于苹果酸和草酸,却使根系分泌物中总氨基酸含量降低。铝胁迫降低安国栝楼中SA含量,却升高浦江栝楼中SA含量。与对照组相比,外源SA显著增加根系分泌物中有机酸含量,且柠檬酸是缓解铝胁迫的主要有机酸。随着外源SA浓度的增加,安国栝楼中柠檬酸合酶活性及浦江栝楼中苹果酸脱氢酶活性呈下降趋势。而安国栝楼中苹果酸脱氢酶及浦江栝楼中柠檬酸合酶呈上升趋势。由此可知,外源SA可通过影响有机酸的代谢而刺激有机酸的分泌,且铝的信号转导途径可能有SA信号途径所介导。 4.利用ISSR分子标记技术对9个栝楼品种进行多态性和聚类分析,结果显示栝楼各种群间的遗传差异较明显,栝楼在物种水平上遗传多样性较高,在种群水平上遗传多样性较低。栝楼种群内的遗传分化程度较大,栝楼种群间的遗传变异要大于种群内。栝楼种群间存在着一定的基因交流。聚类分析结果耐铝性安国栝楼和铝敏感品种浦江栝楼属于不同分支,栝楼的耐铝性差异与遗传距离、遗传一致度及遗传多样性有一定的相关性。