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鸡传染性支气管炎(Infectious Bronchitis IB)是由冠状病毒科(Coronavrindac)冠状病毒属(Coro-navirus)的传染性支气管炎病毒(IBV)引起的一种急性高度接触性传染病。此病在世界各地均有发生,给全球养禽业带来了巨大的经济损失。S1蛋白是宿主的主要保护性抗原,能诱导机体产生中和抗体和血凝抑制抗体,继而使机体得到保护,并决定病毒的组织亲嗜性,在病毒血清学分类中起主要作用。在免疫学方面起着重要作用的S1蛋白一直是研究的热点。S1基因很容易发生变异,使IBV不断出现新的血清型,使养殖过程中经常出现部分免疫或免疫失败,并出现不同的疾病类型。本研究利用PCR技术将鸡传染性支气管炎病毒S1基因分成A段和B段扩增,并将扩增产物克隆到pGEX-6p-1原核表达载体中,酶切鉴定阳性重组菌,并送测序公司测序。利用IPTG进行导表达,SDS-PAGE电泳结果显示有明显融合蛋白表达条带和部分不完全表达蛋白条带。通过IBV特异性抗体的Western-blot检测,两段表达产物均能与抗体发生特异性反应,证明表达产物具有部分抗原性。将两个重组质粒用IPTG低温大量诱导表达,收集菌体,超声波破碎包涵体,用Glutathione Sepharose 4B纯化出A段和B段的GST融合蛋白。将纯化得到的GST融合蛋白包被ELISA板,进行间接ELISA试验,结果表明A、B两段融合蛋白均有良好的抗原性。将纯化得到的融合蛋白加佐剂免疫家兔,连续免疫3次,将得到的抗体与200TOCID50/0.1mlIBV病毒在37℃温育1h后进行气管环中和试验,经Reed和Muench法计算A段抗体的50%血清中和终点为1:18,而B段抗体的50%血清中和终点为1:53,从而表明这两段的表达产物具有较好的生物活性。且B段的生物活性比A段的生物活性要强。