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目的:通过建立昆明小鼠S-180荷瘤模型,观察山仙颗粒对S-180荷瘤小鼠T细胞活性及肿瘤组织中Caspase-3、Caspase-9表达的影响,探讨其抗肿瘤的分子机制。 方法: (1)选取健康雄性昆明小鼠30只,将制备的S-180细胞悬液0. lml(约2X105个/ml瘤细胞)接种于小鼠左前肢腋窝皮下,并随机分为5组,即空白对照组、模型组、山仙颗粒大、中、小剂量组。 (2)根据人、动物体重计量换算,大剂量:2g/kg/d、中剂量lg/kg/d、小剂量0.5g/kg/d,分别相当于临床等效剂量的4、2、1倍。经换算分别用高、中、低浓度山仙颗粒混悬液0.4ml于早、晚各一次给予大、中、小相应组小鼠灌胃,空白对照组与模型组予以等计量生理盐水灌胃,连续30天。 (3)于实验末次给药后24小时,小鼠称重并脱颈椎处死,剥离腋下瘤块、游离脾脏并称重记录。 (4)免疫组织化学法检测S-180实体瘤组织中Caspase-3、Caspase-9的表达。 (5) M T T法检测荷瘤小鼠脾脏淋巴细胞活性。 结果: (1)体内实验表明,山仙颗粒高、中、低浓度(0.1g/ml,0.05g/ml,0.025g/ml)各组对S-180抑瘤率分别为40.37%、25.10%、21.33%,抑瘤率随着山仙颗粒用药剂量增加而升高,且结果具有统计学意义(P<0.01); (2)免疫组织化学法检测S-180肉瘤组织中Caspase-3、Caspase-9的表达:空白对照组与模型组相比较具有显著差异(P<0.01)。山仙颗粒用药各组与模型组相比较具有显著差异(p<0.01)。 (3) MTT实验表明山仙颗粒用药各组小鼠淋巴细胞对于S-180肉瘤细胞的抑制率均髙于模型组(P<0.01);大剂量组抑制率高于中剂量组(P<0.01),中剂量组高于小剂量组(P<0.01),小剂量组高于模型组(P<0.01),且以上各组结果均与作用时间呈正相关。 结论: (1)山仙颗粒对S-180肉瘤细胞具有杀伤抑制作用,且其抑制作用与山仙颗粒剂量呈正相关。 (2)山仙颗粒可以上调S-180肉瘤细胞中调亡蛋白酶Caspase-3、Caspase-9的表达,其表达水平与山仙颗粒剂量呈正相关。 (3)山仙颗粒的抗肿瘤机制可能与其增强机体抗肿瘤免疫、抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡相关。