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马蹄莲属(Zantedeschia)为天南星科(Araceae)植物,全属共7种2亚种。按其习性分为两组:一组为常绿组(Sect.1. Evergreen),另一组为落叶组(Sect.2. Deciduous)。常绿组品种耐寒性、抗病性均较强,常见的仅一种,即:白花马蹄莲(Z.aethiopica);落叶组品种通常称为彩色马蹄莲,色彩艳丽,品种繁多,是当前国际流行主栽的品种,已注册的商业品种多达150多个,其中常用品种60多个,多数品种是由美国、新西兰和荷兰等国家的马蹄莲专业公司或科研机构培育和开发的。本研究以马蹄莲属88份品种资源为研究材料,从形态学观测入手,应用ISSR-PCR分子标记、石蜡切片、花粉的生活力测定、品种间杂交等技术方法,开展了品种资源的形态学、DNA指纹图谱分析和生殖生物学研究,详细观察描述了马蹄莲主要的形态特征,找出了马蹄莲一致性、稳定性和特异性性状,制定出“马蹄莲属植物新品种DUS测试指南”,提出了基于分子标记结果的品种群分级标准,对马蹄莲属植物大小孢子发生和雌雄配子体发育过程进行了研究,在扫描电镜下观测了花粉显微形态特征,进而进行花粉生活力测定萌发试验,验证了花粉的活力和萌发特性以及品种杂交的生物学特性。主要结论如下:1.马蹄莲属品种的叶型有披针形、卵形、三角形和戟形;花色有白色系、黄色系、橙色系、粉色系、红色系、紫色系和双色系等7种类型;佛焰苞从俯视角度分为锐角形、钝角形和圆形三种类型。2.马蹄莲品种性状具有良好的一致性、稳定性和特异性,经形态学性状综合比较分析,筛选出来具有良好一致性特征的39个性状,经与UPOV测试指南比较,起草制定了《植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南马蹄莲属》,已获准向农业部报批(见附录2)。3.经正交试验设计统计分析,提出了马蹄莲的ISSR-PCR优化反应体系,即25μl反应体系中,含有10×PCR buffer2.5μl,Mg2+2.0mmol/l,dNTPs0.20mmol/l,Taq酶1.5U,引物0.25μmol/l,DNA模板1.0ng/μl。从96对引物中筛选出了15对适合进行ISSR-PCR研究,共扩增出690个位点,其中435个为多态性位点,平均每对引物扩增出46个位点和29个多态性位点,多态性比率为63.04%。4.运用UPGMA聚类法对ISSR-PCR分子标记结果进行分析,在相似系数0.15处可将88份材料分为常绿马蹄莲和落叶马蹄莲二组;在相似系数0.29处可将87个落叶马蹄莲品种划分为盆栽品种亚群、切花品种亚群和盆花切花兼用品种亚群,每个亚群内根据花色可分为白花品种、黄花品种、橙花品种、红花品种及紫花品种等,与品种的表型性状相一致。5.筛选出了6对可用于构建马蹄莲品种指纹图谱的核心引物,并绘制了指纹图谱模型。6.研究发现彩色马蹄莲品种‘Majestic Red’胚珠倒生,双珠被,厚珠心,具珠被绒毡层。大孢子母细胞减数分裂形成的四分体呈直线排列或T型,合点端的大孢子发育为功能大孢子,其余3个大孢子退化,胚囊为单孢子发生的蓼型胚囊发育方式。每花通常有雄蕊2-3个,蝶形花粉囊,每侧由2个小孢子囊构成。花药壁由外到内依次为表皮、药室内壁、中层和绒毡层,绒毡层属变形绒毡层类型,小孢子形成时胞质分裂为修饰性同时型,小孢子排列成十字形四分体,成熟花粉为二胞花粉粒。小孢子在四分体时期,绒毡层细胞提前降解,致使释放的小孢子不能正常发育。7.经扫描电镜观测,18个马蹄莲品种的花粉大小、形状较一致,为长球体形,畸形率为5.88%~43.59%,花粉极轴长为28.8~39.5μm,赤道轴长为21.9~32.3μm,各品种P/E值范围为1.14~1.43。花粉外壁光滑,纹饰不明显,无萌发沟。8.在25℃恒温培养箱内暗培养条件下,6个马蹄莲品种花粉萌发率和花粉管长度均在24h内达到最高值,其中尤以9h内生长为主,筛选出附加10%蔗糖和0.01%硼酸的培养基为花粉活力培养检测的最适宜配方。