天然抗癌植物性药物以其毒副作用小、生物活性强和不易产生耐药性等优点逐渐成为人们研究的焦点。金龙胆草(Conyza blinii H.Lev.)为菊科白酒草属植物苦蒿的干燥地上部分,分布于我国云南、四川等省。具有清热解毒、消炎祛痰、止咳平喘之功效,用于治疗胃肠炎、慢性气管炎。金龙胆草总皂苷(Conyza blinii saponin,CBS)成分主要为三萜皂苷,生物类皂苷属植物次级代谢产物。大量的流行病学调查、动物实验及体外实验研究结果表明:皂苷有多成分,多途径,多机制的抗肿瘤作用。为了研究金龙胆草总皂苷的抗肿瘤活性及其作用机制,本文先通过MTT检测金龙胆草总皂苷对多种肿瘤细胞活力的影响。结果表明,金龙胆草总皂苷有广谱的抗肿瘤作用,对多种癌细胞具有体外抑制作用。其中,CBS对宫颈癌HeLa细胞最为敏感,其24 h的体外IC50为19.4 μg/mL。然后以HeLa细胞为研究对象,通过DAPI染色、DNA Ladder、细胞流式、半定量PCR、划痕实验、Transwell实验、蛋白免疫印迹法(Western blotting)等实验分别检测金龙胆草总皂苷对HeLa细胞的凋亡、细胞周期、迁移和侵袭的影响。研究结果表明,CBS可以将细胞周期阻滞在S期,诱导细胞凋亡的发生,抑制细胞的迁移和侵袭。进一步研究表明,CBS通过活化caspase-9,进而激活caspase-3,促使HeLa细胞通过线粒体途径凋亡。半定量PCR实验表明CBS能上调p53基因mRNA水平,并能上调周期蛋白依赖性激酶(cyclin dependent kinase,CDK)抑制因子 p21、p27 和 p57 的 mRNA 水平。综上所述,金龙胆草总皂苷可以通过线粒体途径引起HeLa细胞凋亡,影响细胞周期,并能抑制细胞的增殖和迁移。毒性实验表明CBS对正常的细胞毒性相对较小,这将为金龙胆草总皂苷开发作为抗肿瘤药物的研究奠定了理论和物质基础。