论文部分内容阅读
采用热变性法、超滤技术和离子交换柱层析(DEAE-52)技术,分别从四种不同的动物(猪、黄牛、鸡和鸭)胰脏中分离、纯化和制备电泳纯铁蛋白,分别称为猪胰铁蛋白(Pig Pancreas Ferritin,PPF)、黄牛胰铁蛋白(Scalper Pancreas Ferritin,SPF)、鸭胰铁蛋白(Duck Pancreas Ferritin,DPF)和鸡胰铁蛋白(Chicken Pancreas Ferritin,CPF)。进一步结合聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术,小批量制备质谱纯铁蛋白,用于组成与结构分析。天然PAGE技术分析指出,胰脏铁蛋白的电泳迁移率为VPPF>VSPF>VDPF>VCPF,即它们的分子量大小可视为CPFMW>DPFMW>SPFMW>PPFMW,但均大于马脾铁蛋白(Horse Spleen Ferritin,HSF)。SDS-PAGE技术指出,CPF、DPF、SPF和PPF均由H和L类型的亚基组成,但它们的H/L比值略有差别。选用肽质量指纹图谱(PMF)技术分别鉴定4种胰脏铁蛋白的H和L亚基。CPF、DPF、SPF和PPF分别经SDS处理后,均显示出3-6种不同等电点亚基或不同亚基聚合体,这一现象说明不同来源铁蛋白的H和L亚基之间相互作用强度呈复杂化,并存在着不同亚基聚合体和差异性,推测这些亚基结构差异特性可能与铁蛋白控释铁速率有关。通过研究,作者发现PPF具有以下三个特性:(1)PPF的H/L亚基组成比例为1:2,亚基聚合方式有:L-L、L-H和H-H;(2)PPF释放铁的动力学速率规律与PSF、HSF包括其他哺乳动物铁蛋白较为相似;(3)PPF亚基结构特征略不同于其他哺乳动物铁蛋白,推测这一异常分子结构与PPF释放和储存铁速率和途径的异常有关。探讨在不同pH和不同反应时间条件下,脱铁核猪胰铁蛋白(apoPPF)捕获Zn2+规律,并建立分析计算式,其结果可为后续构建纳米顺铂核-铁蛋白和开发研制抗肿瘤药物新载体奠定良好的研究基础和提供有价值的科学依据。