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第一部分抗CCL20抗体对哮喘小鼠气道炎症和气道高反应的抑制作用目的：观察趋化因子配体20（CCL20）在小鼠肺组织内的表达情况，探讨抗小鼠CCL20单克隆抗体（MCA-CCL20）对哮喘小鼠肺部炎症和气道高反应的影响。方法：6~8周龄BALB/c小鼠随机分为4组:哮喘组（OVA）、正常对照组、CCL20单克隆抗体组(单抗组)和治疗对照组，每组8只。哮喘组予卵蛋白（OVA）致敏和激发建立哮喘小鼠模型，单抗组和治疗对照组致敏和激发同哮喘组，但自第一次激发起，雾化前1h分别腹腔注射MCA-CCL20或磷酸盐缓冲液（PBS），连续5d。正常对照组用PBS替代OVA进行致敏和激发。末次雾化激发后24h体描仪测定小鼠气道反应性，HE染色观察肺组织病理炎症及程度评分，免疫组化及图像分析和实时聚合酶链反应（Real-time PCR）分别测定小鼠肺组织CCL20的蛋白含量和基因表达水平。结果：哮喘组小鼠肺组织切片炎症浸润及病理评分、气道高反应、肺组织CCL20mRNA相对表达量及免疫组化CCL20平均光密度值均显著高于正常对照组。与哮喘组相比，单抗组小鼠肺部细胞浸润减轻（p＜0.05），肺功能（乙酰甲胆碱浓度为25~50mg/ml时）Penh降低（p＜0.05），肺组织切片CCL20平均光密度值明显降低（p＜0.01）,而CCL20mRNA表达无明显改变。结论：CCL20单克隆抗体可改善OVA诱发的小鼠哮喘炎症和气道高反应，其抑制作用可能涉及抗鼠CCL20单抗阻断部分CCL20活性有关。第二部分TGF-β1和抗CCL20抗体联合治疗对BALB/c哮喘小鼠气道炎症和气道高反应的疗效观察及初步机制研究目的：探讨在TGF-β1和抗CCL20抗体(MCA-CCL20)联合干预对哮喘小鼠气道炎症和气道高反应的影响，初步阐述可能的机制。方法：6~8周龄雌性BALB/c小鼠随机分为5组:哮喘组、对照组、MCA-CCL20干预组(单抗组)、TGF-β1干预组和MCA-CCL20+TGF-β1干预组（联合组）。哮喘组予卵蛋白（OVA）及佐剂混合物致敏和1％OVA激发构建哮喘小鼠模型。单抗组、TGF-β1干预组及联合组致敏和激发方法同哮喘组，但自第一次激发起，单抗组雾化前1h分别腹腔注射MCA-CCL20，连续5d；TGF-β1干预组于首次雾化激发前1h气管滴入TGF-β1；联合组为MCA-CCL20和TGF-β1联合干预。对照组用PBS替代OVA进行致敏和激发。末次激发后24h用体描仪行小鼠肺功能检测，收集BALF，进行细胞计数及分类计数，HE染色观察肺组织病理炎症，免疫组化检测肺组织CCL20、Smad6，Real-time PCR测定小鼠肺匀浆CCL20、Smad6、TGF-β1mRNA表达及ELISA检测BALF中TGF-β1、TNF-α和IL-1β含量。结果：MCA-CCL20干预OVA诱发的哮喘小鼠后，肺组织切片CCL20蛋白表达的阳性颗粒颜色明显变浅，着色范围明显变窄，BALF中IL-1β、TNF-α含量减低（p＜0.01）；TGF-β1干预后，小鼠肺组织Smad6着色分布范围更广及颜色明显加深且Smad6mRNA呈高表达；TGF-β1与MCA-CCL20联合干预可见上述单独干预的所有表现，且BALF中TNF-α下降水平更加显著。TGF-β1或MCA-CCL20二者单独干预后，哮喘小鼠的BALF细胞总数、淋巴细胞及嗜酸细胞计数比例皆降低，肺部炎性细胞浸润减轻，气道高反应降低，肺功能得以改善。TGF-β1与MCA-CCL20联合干预比单独干预更能显著地减轻小鼠肺组织炎性细胞浸润，且在雾化吸入乙酰甲胆碱浓度自12.5mg/ml至50mg/ml时，肺功能Penh较其他干预组有极显著降低（p＜0.001）。结论：TGF-β1与MCA-CCL20联合干预组通过上调Smad6的表达，降低IL-1β、TNF-α含量，中和或减少CCL20的释放，能够较单独干预组更明显减轻哮喘炎症，降低气道高反应，改善肺功能，为生物制剂治疗哮喘提供实验基础。