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近年来,脑血管疾病的发病率呈不断上升趋势,手术患者在围术期发生脑缺血或脑损伤的危险性升高,为避免由于手术或麻醉的因素导致术后神经系统功能障碍,尤其是对于高危患者,合理的麻醉管理及预防显得尤为必要。预处理现象的发现为脑损伤机制研究及预防开辟了新的途径。越来越多的实验证明吸入麻醉药异氟醚(Iso)具有明显的脑保护作用,在围术期预防脑缺血损伤中可能具有重要价值;电针己广泛应用于脑血管疾病的治疗,研究发现缺血前给予电针预处理可同样产生脑保护作用,减轻脑缺血的损伤作用。本实验在以前研究的基础上,进一步探讨脑缺血前给予Iso或电针预处理所诱导的脑保护作用及其机制,为预处理方案应用于临床提供依据。 目的: 1、探讨钠离子通道在Iso预处理诱导延迟相脑缺血耐受中的作用 2、探讨腺苷A1受体和细胞内Ca2+浓度的变化在Iso预处理诱导快速相脑缺血耐受中的作用; 3、研究电针预处理诱导脑缺血耐受的时程及其可能机制。 第四里匠大学硕士学位论文 方法: l、钠离子通道在ISO预处理诱导延迟相脑缺血耐受中的作用 采用线栓法制作右侧大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,缺血前ISO组动物给予吸入1.5%Iso预处理 lh,连续sd Lidocaine组给予盐酸利多卡因Omg·kg’,w)连续5天;Lidocaine刊So组在*o处理乙前给予利多卡因:Control组,即单纯缺血再灌注络最弓一次处理24h后行MCAO模型。观察缺血 120min再灌注 24h后神经功能损害,并用 TTC染色技术测量脑梗死容积。 2、腺昔AI受体在ISO诱导的快速相脑缺血耐受中的作用 局灶性脑缺血模型同上。各组动物在缺血前lh分别接受不同处理:C。n汀。1组,动物吸入98%氧气lh:*P*PX组,动物在吸入98%氧气lh前给予腹腔注射腺昔 AI受体阻断剂 8-环戊基J,3-二丙基黄嘿吟(DPCPX);卜。组动物给予吸入1.5%卜。和%%氧气lh:*P*P*ns。组和**S*+卜。组在接受吸入 l.5%IS。和 98%氧气 lh前分别给予腹腔注射 DPCPX和溶剂二甲基亚矾(DMSO)。缺血 120min再灌注 24后进行神经功能损害评分,测量脑梗死容积。 3、ISO预处理对缺血/再瀑注(k)损伤神经细胞内游离钙的影响 1/R组、ISO组和 DPCPX+ISO组的动物均采用插线法制作 MCAO模型。Iso和 DPCPX+ISo组,缺血前 lh给予 1.5%ISo预处理 60min,DPCPX+ISo组动物在 Iso处理前给予 DPCPX。缺血 120min再灌注 Zh后取脑并切片,利用激光共聚焦扫描显微镜和 FlllO—3荧光探针标记技术检测活体脑片细胞内C4”含量的变化。 4、单次电针预处理诱导脑缺血耐受的时程 取大鼠百会穴,电针刺激30min后分别在 1/2、l、2、3和 24h给予短暂性局灶性脑缺血。并在阻断血流120min后给予再灌注。观察再灌注24h -3- 第四军医人学硕士学位论文后神经功能损害程度,并利用TTC染色技术测量脑梗死容积。 5、腺苦AI受体参与单次电针预处理诱导的脑急性缺血耐受 电针刺激方法同前实验,并在电针预处理之后Zh行MCAO模型( 20min),再灌注 24h后观察神经功能损害评分及脑梗死容积。同时观察了在电针预处理之前给予腺昔 AI受体阻断剂 DPCPX(ling·kg-‘,lp)对电针预处理诱导脑缺血耐受作用的影响。 结果: 1、再灌注24h时神经功能损害评分及脑梗死容积,Is。组均明显小于其余 3组(P<0.05),而 Lidocaine+Iso组及Lidocaine组的神经功能学评分及脑梗死容积与Cofltrol组均无明显差异(P>0刀引。 2、Iso组动物神经功能损害较 Control组明显减轻(P<0。of),脑梗死容积亦明显小于Control组(P<0.001)。*P*P*0so组动物神经行为学损害加重,脑梗死容积亦明显大于卜。组(P<0刀1),与Conh*组相比则无差异。DPCPX单独应用不增加缺血后神经功能损害及脑梗死容积。 3、脑W时缺血侧皮层及纹状体区域细胞内o”含量增加,非缺血侧无明显变化。缺血前给予IS。预处理可明显降低MCAO引起的皮层细胞内C/”含量增加o<0.05人 DPCPX可阻断kO的上述作用,致 I/R后神经细胞内CaZ”含量与I/R组无差异。 4、电针刺激百会穴 30min后 Zh和 24h给予局灶性脑缺血,再灌注 24h时神经功能损害与对照组比较有明显减轻0功.05),脑梗死容积亦明显小于对照组(<O.05),其它时间点与对照组相比均无显著差异。 5、电针预处理后可明显减轻缺血120min再灌注24h所致神经功能损害,减小脑梗死容积,电针预处理前应用DPCPX的动物神经功能损害评分和脑梗死容积均与对照组无差异。 -4- 第四旱医人学硕士学位论文结论:1、重复吸入IS。可诱导产生延迟相脑保护作用,预处理前给予利多卡 因可减弱此保护作用;2