卵巢癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一,早期发现难,治疗效果差,预后不良,死亡率高。分子伴侣(molecular chaperone)是一类与其他蛋白的不稳定构象相结合并使之稳定的蛋白质,通过控制结合和释放来帮助被结合多肽在细胞内进行折叠、组装、转运、降解等,维持细胞的内稳态。Mortalin,又名Grp75/PBP74/mthsp70,是HSP70分子伴侣家族成员之一,其广泛分布于多个细胞器和胞浆,参与细胞增殖和胞内运输、调控应激反应、稳定细胞骨架、抑制细胞凋亡等。研究发现在许多肿瘤中,如慢性粒细胞白血病、结肠、颅脑肿瘤、乳腺癌和肝癌中mortalin表达上调。过表达mortalin可以增加乳腺癌细胞的恶性程度,参与肝转移。课题组先前通过对183例卵巢癌组织以及癌旁组织中的组织芯片检测结果显示,mortalin在卵巢癌组织中表达明显高于癌旁组织；且mortalin的表达与卵巢癌的分期有关,分期越高的卵巢癌组织中,mortalin表达量越高。提示,mortalin高表达可能与卵巢癌的发生、发展有关。本课题选取8株卵巢癌细胞系A2780/cis、COC1、HO-8910、PM-8910、 OV-90、Caov-3、SKOV-3和ES-2,分别在蛋白质水平和mRNA水平检测其mortalin的表达量。研究表明,在8株细胞系中,OV-90细胞中]mortalin的mRNA和蛋白的表达量最低,而顺铂耐药型卵巢癌细胞系A2780/cis和腹水中提取的卵巢癌细胞COC1的mortalin的mRNA和蛋白的表达量最高。课题组之前的实验结果显示,人卵巢癌顺铂敏感型细胞系A2780中mortalin表达量明显低于人卵巢癌顺铂耐药型细胞系A2780/cis。以上结果提示,motalin的表达与卵巢癌细胞的恶性程度可能有关。随后,选取人卵巢癌顺铂敏感型细胞系A2780和人卵巢癌顺铂耐药型细胞系A2780/cis,通过构建mortalin上调、下调的慢病毒载体,分别感染两株细胞,经流式筛选分别获得mortalin上调表达、下调表达稳定株。通过CCK-8(Cell Counting Kit-8)实验、克隆形成实验,细胞划痕实验和transwell细胞侵袭实验分别检测细胞活力、克隆形成率和细胞侵袭转移能力。结果显示,mortalin表达量增高可以促进卵巢癌细胞的细胞增殖、增加单个细胞克隆形成的大小和数量,并能促进细胞迁移,增加其转移侵袭能力；而降低mortalin的表达,可以有效抑制卵巢癌细胞的细胞增殖、单个细胞克隆形成的大小和数量,并能抑制细胞迁移,降低其转移侵袭能力。以上结果提示,mortalin的表达与卵巢癌细胞的发生、发展及侵袭有关,而下调mortalin表达能有效抑制卵巢癌细胞的侵袭,延缓卵巢癌的发生、发展。流式细胞仪检测mortalin表达对细胞周期的影响,Western Blot检测细胞周期蛋白的表达变化。结果显示,mortalin高表达可以促进细胞快速通过G1/S期,进入G2/M期,同时会增加细胞内Cyclin-D1和C-myc的表达量,降低细胞内Cyclin-B1的表达量；而mortalin下调表达会延迟细胞通过G1/S期,同时会增加细胞内Cyclin-D1和C-myc的表达量,降低细胞内Cyclin-B1的表达量。为了研究mortalin在卵巢癌发生发展过程中的作用机制以其可能的信号通路,通过Western Blot实验检测一系列信号通路相关蛋白表达情况,结果显示,mortalin可以特异性的促进c-Raf和Erk1/2的磷酸化,但并没有影响JNK的活化。因此推测,mortalin可以通过MAPK-ERK信号通路其促进卵巢癌细胞的增殖和侵袭迁移。综上所述,mortalin上调表达参与了卵巢癌的发生、发展,下调mortalin可以通过减慢细胞从G1期向G2/M期过渡,有效降低卵巢癌细胞的生长速度和侵袭转移率,并且这一过程与其对MAPK-ERK信号通路的激活有关。因此,mortalin可以作为治疗卵巢癌的一个潜在靶点。