含原花青素的纳米级无定形磷酸钙再矿化体系对树脂牙本质粘接强度和耐久性的影响

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背景牙本质湿粘接技术能提高树脂-牙本质即刻粘接强度,改善树脂粘接修复质量,已广泛应用于临床。人体中牙齿及其修复体长期处于高湿度、弱酸性、富含微生物的口腔环境中,进食时牙齿的咬合负载及口腔内温度也会产生剧烈变化,因此树脂牙本质粘结界面的稳定性受到巨大挑战。此外,由于混合层水分残留、树脂粘接剂渗入率低、湿粘接技术敏感性、树脂材料的水解特性,混合层裸露胶原易被内源性牙本质蛋白酶酶解破坏等因素影响,导致牙本质树脂修复后的混合层产生薄弱区,降低粘接强度,影响粘结耐久性。研究表明牙本质仿生再矿化能使混合层底部裸露胶原受到矿物保护,提高其机械性能及树脂-牙本质粘接强度,但再矿化过程往往需要几个月的时间。本课题组建立含原花青素的纳米级无定形磷酸钙再矿化体系,矿化3-5 μm脱矿层所需时间为1-2天,但该体系对树脂-牙本质即刻粘接强度及粘接耐久性的影响还有待研究。目的研究含原花青素的纳米级无定形磷酸钙再矿化体系预处理酸蚀脱矿后的牙本质,使用10%次氯酸钠模拟口内老化条件,通过扫描电子显微镜分析脱矿层及混合层微观形貌、微拉伸测试分析粘接强度,来探究该体系对提高树脂-牙本质粘接强度及粘接耐久性的可行性。方法根据课题组前期研究的仿生再矿化体系,配制含原花青素的牙本质再矿化液。采用40颗磨牙及32片牙片制备标准粘接面,酸蚀后按照随机化原则分成再矿化组和对照组(每组20颗牙和16片牙片):再矿化组放入再矿化液中浸泡处理1 d;对照组无再矿化处理。两组牙片样本分别使用10%次氯酸钠溶液处理0、1、2、3小时(每亚组4个牙片),应用扫描电子显微镜观察牙片的表面形貌及微观结构。两组磨牙样本制备成微拉伸测试所需的牙条样本(每组80根牙条)。各组牙条使用10%次氯酸钠溶液处理0、3小时(每亚组40根),进行微拉伸测试,计算粘接强度,并用扫描电子显微镜观察牙本质端粘结断裂面,计算次氯酸钠溶解破坏区域面积百分比。所有数据使用SPSS Statistics 20.0进行统计学分析。结果1含原花青素的纳米级无定形磷酸钙再矿化体系处理牙本质标准粘接面1天后,扫描电镜观察牙片表面形态,发现与对照组相比,胶原直径增粗,呈现绳索状,表面粗糙,有体积较大的矿物颗粒沉积,表明脱矿胶原发生了再矿化。微拉伸实验结果表明,再矿化组即刻粘接强度显著大于对照组(P<0.05)。2扫描电镜观察牙片表面形态,发现经10%次氯酸钠处理1、2、3小时,对照组脱矿层胶原纤维被次氯酸钠破坏,且破坏程度随时间延长逐渐加重;再矿化组脱矿层胶原已被新形成的矿物包裹,经次氯酸钠处理1、2、3小时后胶原未明显破坏。3微拉伸实验结果表明,10%次氯酸钠处理3小时后,两组的粘接强度均有下降(P<0.05),但再矿化组显著大于对照组(P<0.05)。扫描电镜观察牙本质端断裂界面发现,再矿化组的次氯酸钠溶解破坏面积百分比显著小于对照组(P<0.05)。结论本实验提示,在nano-ACP仿生再矿化体系中,加入原花青素作为胶原纤维交联剂及钙离子螯合剂,再矿化脱矿牙本质的时间为1天,使用该体系再矿化脱矿牙本质,可保护混合层裸露胶原,使树脂-牙本质即刻粘接强度及以NaClO为模拟老化因素的树脂-牙本质粘接耐久性均得到显著提高。
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