水曲柳（Fraxinus mandshurica Rupr.）是东北地区珍贵的硬阔树种,同时也是我国东北地区重要的用材树种和园林绿化树种。在水曲柳体细胞胚诱导培养研究过程中发现,体细胞胚发生率较低,而畸形体胚的发生率却较高,这不仅影响体细胞胚发生的同步化,同时也严重的制约体细胞胚的萌发、生根以及体胚苗的正常转株,畸形体胚的高频率发生成为提高水曲柳体细胞胚繁殖率和增加其稳定性的主要障碍之一。为了研究水曲柳畸形体胚发生的影响因子及其发生机理,本试验通过控制体细胞胚发生的外界因子（低温、蔗糖、琼脂、硝酸银、PEG 4000、ABA、NAA和6-BA）培养水曲柳未成熟合子胚子叶,利用单因素试验设计、双因素交叉设计及混合水平均匀设计法,研究外界因素对水曲柳畸形体胚发生的影响,找出降低水曲柳畸形体胚发生的最佳培养条件及试图提高水曲柳正常体细胞胚的发生率。其主要结论如下:低温预处理时间和分化培养基蔗糖浓度显著影响水曲柳体细胞胚胎发生数、子叶胚发生数及畸形胚发生数,而分化培养基硬度、PEG 4000浓度、银离子浓度、ABA浓度、6-BA浓度及NAA浓度对以上指标影响不大。其中对外植体低温预处理20 d有利于正常胚发生率的提高。调控分化培养基的蔗糖浓度、琼脂浓度、银离子浓度、PEG 4000浓度、ABA浓度、NAA浓度和6-BA浓度不能明显降低水曲柳畸形胚的发生数和发生率,畸形体胚的发生可能与水曲柳的遗传背景有关。不经过低温预处理,经前期诱导培养2周后,转入分化培养基,分化培养基为MS 1/2+酸水解酪蛋白400 mg·L^-1+蔗糖70 g·L^-1+6-BA 0.5 mg·L^-1+ABA 2 mg·L^-1+琼脂8 g·L^-1时有利于促进水曲柳体胚发生,但畸形体胚发生率仍较高。