研究背景与目的:肠道具有重要的免疫防御和免疫监视功能,而这主要基于肠上皮屏障。肠上皮屏障功能受损会引发多种疾病。因此研究调控肠上皮屏障损伤的分子机制是必要的。TMEM30A与细胞膜的稳定性、囊泡转运、细胞分化等生命过程密切相关,既往有研究表明TMEM30A对于视觉、听觉、以及脑神经系统的功能具有重要作用。然而TMEM30A在肠上皮屏障的作用尚不明确。本研究旨在通过构建肠上皮特异性敲除Tmem30a基因小鼠模型,探究TMEM30A调控肠上皮屏障的功能特性,以及何种调控方式。研究方法:首先使用q RT-PCR检测IBD患者病变的黏膜组织及DSS结肠炎小鼠的肠上皮Tmem30a表达。然后通过免疫荧光探究TMEM30A在肠道的表达定位。接下来采取Genotyping和q RT-PCR对肠上皮特异性敲除小鼠进行基因型鉴定和敲除效率确认。使用FD4评估小鼠肠道通透性;HE染色、免疫荧光染色、PAS染色、荧光桃红染色、流式细胞术、q RT-PCR依次观察小鼠肠道形态结构,潘氏细胞、杯状细胞,肠上皮间淋巴细胞的数量和功能。16S测序检测小鼠肠道微生物群。最后采取DSS和NSAIDS模拟结肠和小肠损伤,评估炎症状态下Tmem30a缺失小鼠的肠道炎症损伤表型。研究结果:本研究发现IBD病人病变黏膜组织和DSS结肠炎小鼠肠上皮,Tmem30a表达明显降低,随后检测到TMEM30A主要定位于肠上皮。为了明确TMEM30A对于肠上皮屏障功能,特构建肠上皮特异性Tmem30a敲除小鼠。对小鼠本底研究发现敲除小鼠的体重增长率与WT小鼠无明显差异,肠道形态基本正常未见明显改变,然而研究表明敲除小鼠的肠道通透性显著增加,潘氏细胞数量明显减少,肠上皮间淋巴细胞稳态破坏,肠道微生物菌群的多样性以及组成发生变化。通过实验进一步证明药物诱导的模型中敲除小鼠的肠道炎症损伤表型较对照组更为严重。研究结论:尽管敲除Tmem30a不会直接导致肠道结构损伤,却可通过维持肠上皮屏障功能调节肠黏膜免疫稳态。