白头翁汤治疗禽巴氏杆菌病的机理研究

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目的:为探讨白头翁汤治疗禽巴氏杆菌病的机理,本试验通过人工方法建立禽巴氏杆菌病动物模型,使用不同浓度白头翁汤水煎剂治疗该病,筛选出最佳治疗浓度,为该病的防治提供措施。方法:绘制禽巴氏杆菌生长曲线,测定禽巴氏杆菌半数致死量LD50,确定禽巴氏杆菌感染鸡的细菌数;体外药敏试验检测白头翁汤对禽巴氏杆菌的抗感染情况。将100只3月龄鸡随机分为阴性组、模型组、白头翁汤(低、中、高)剂量组,每组20只。除阴性组外,其余各组鸡每只接种禽巴氏杆菌5.0×107 CFU/mL菌液1 mL。模型组、阴性组饮水,低剂量组、中剂量组、高剂量组分别自由饮用7.8 mg/mL、15.6 mg/mL、31.3 mg/mL白头翁汤。给药后第1d、3d、5d、7d翅下采血,每组随机选取5只鸡,称重,放血处死,采集肺脏、肾脏、十二指肠固定于多聚甲醛,HE染色观察病理变化;又取肺脏、十二指肠固定于卡诺氏液,TB染色,观察肥大细胞分布情况;采用ELISA方法测定血清中TNF-α、IL-1、H4R含量。结果:1.禽巴氏杆菌菌液OD600nm值与活菌数相关性存在阶段性,在稳定期以前存在增长趋势的正相关;活菌数较高OD600nm值范围为0.3-0.55,半数致死量(LD50)为5.0×107 CFU/mL。2.白头翁汤对禽巴氏杆菌体外最小抑菌浓度为3.91 mg/mL。3.肺脏病理评分和肺脏系数显示,阴性组均差异极显著(P<0.01)低于治疗组和模型组,模型组差异显著(P<0.05)高于治疗组。4.试验期间,模型组肺脏、十二指肠肥大细胞数均极显著(P<0.01)高于阴性组。第3d、5d、7d治疗组肺脏肥大细胞数显著(P<0.05)低于模型组,第1d、3d、5d、7d治疗组肺脏肥大细胞数显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于阴性组。治疗组十二指肠肥大细胞数显著(P<0.05)低于模型组;第1d、3d、5d、7d肥大细胞数显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于阴性组。5.禽巴氏杆菌感染实验鸡的过程中,血清中TNF-α、IL-1、H4R含量呈现先增高后降低的趋势,且第3d或第5d显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)升高,3种不同浓度白头翁汤对血清中TNF-α、IL-1、H4R含量显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)降低,中剂量(15.6 mg/mL)组效果最佳。结论:1.白头翁汤对禽巴氏杆菌体外最小抑菌浓度为3.91 mg/mL。2.白头翁汤中药方剂能有效缓解禽巴氏杆菌病患鸡肺脏损伤。3.白头翁汤治疗组肺脏、十二指肠肥大细胞数量均显著低于模型组而高于阴性组。4.白头翁汤中药方剂治疗禽巴氏杆菌病过程中可显著降低炎症因子TNF-α、IL-1、H4R的含量。
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