豆腐柴叶总黄酮提取、分离及抗氧化活性研究

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豆腐柴叶中不仅含有大量的果胶、粗纤维、粗蛋白、可溶性糖,还含有丰富的矿物质和黄酮类物质。四川绵阳江油地区豆腐柴资源丰富,且有用豆腐柴树叶加工树叶豆腐的传统习惯。为更好的了解与利用江油地区豆腐柴资源,本文以江油豆腐柴为原料,首先优化豆腐柴黄酮提取工艺,再采用大孔吸附树脂对其进行分离纯化,最后进行抗氧化活性研究,具体研究内容及结果如下:1、采用乙醇浸提法对豆腐柴叶总黄酮进行提取,在单因素试验基础上,采用响应面法优化豆腐柴叶总黄酮提取工艺。结果表明:乙醇浸提法提取豆腐柴叶总黄酮的最佳工艺条件为:乙醇浓度84%、料液比1:34 g·mL-1、温度80℃、时间3.25 h,该条件下总黄酮得率为7.26%。2、利用大孔吸附树脂对豆腐柴叶总黄酮进行分离纯化研究,先筛选出适用于分离豆腐柴叶总黄酮的大孔吸附树脂,再考察影响树脂静态吸附的主要因素,优化了豆腐柴叶总黄酮分离纯化条件。结果表明:X-5型大孔吸附树脂适用于分离豆腐柴叶总黄酮,优化得到的分离条件为:静态吸附时间3 h,解吸附时间2 h,样液浓度为0.6 mg·mL-1,样液pH为4.0,吸附和解吸附温度分别为30℃和55℃,解吸附乙醇浓度为95%。在此条件下进行分离纯化后得到的豆腐柴叶总黄酮为棕黄色粉末,纯度为85.34%。采用紫外可见光谱扫描和显色反应初步鉴定。结果表明,豆腐柴叶总黄酮的主要成分为二氢黄酮。3、通过测定豆腐柴叶总黄酮的DPPH自由基清除能力、羟基自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力、总抗氧化能力、还原力及ABTS阳离子自由基清除能力,研究了豆腐柴叶总黄酮的抗氧化活性。结果表明:乙醇浓度75%提取得到的豆腐柴叶总黄酮抗氧化活性最好,各萃取层中抗氧化活性最好的是乙酸乙酯层,其对ABTS阳离子自由基的清除能力明显优于VC。最后,利用相关系数矩阵分析、公因子方差、主成分提取、抗氧化综合得分及排序,从而确定了主成分分析在抗氧化剂筛选中应用的可行性和优越性,为食品中抗氧化剂活性评价和筛选提供一种思路与方法。
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