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目的:研究神经生长因子(NGF)和高压氧(HBO)早期干预治疗对新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的保护作用,以及反映新生鼠HIBD后神经细胞再生、神经干细胞(NSC)激活指标的动态变化,为临床上对新生儿HIBD早期给予HBO和NGF治疗从神经细胞形态和理论上提供依据。
方法:通过结扎并剪断96只7日龄新生Wistar大鼠右侧颈总动脉,吸入8%O<,2>+92%N<,2> 2 h制备新生鼠HIBD模型,设置HIBD对照组、HBO治疗组和NGF治疗组,另取32只为假手术组。5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记中枢神经系统(CNS)新生神经细胞,通过免疫组化方法和计算机图像分析技术检测四组大鼠不同时点(术后4 d、7 d、14 d、21 d)海马齿状回(DG)巢蛋白(Nestin)、BrdU的表达变化及光镜下脑组织病理改变。
结果:
1.脑组织病理改变:假手术组大鼠无异常病理改变;HIBD对照组大鼠海马锥体细胞层次减少、排列紊乱,术后4~7 d出现胶质细胞增生,部分神经细胞核固缩、碎裂,术后14~21 d大量神经元丢失,胶质瘢痕形成;HBO治疗组和NGF治疗组大鼠病理改变较HIBD对照组明显减轻。
2.Nestin表达;四组大鼠海马DG区Nestin的表达均于术后4 d达到高峰,各时点HIBD对照组Nestin阳性细胞数较假手术组增加,比较差异均有显著性(P<0.05),HBO治疗组和NGF治疗组Nestin阳性细胞数均较假手术组和HIBD对照组明显增多,比较差异均有显著性(P<0.01);NGF治疗组Nestin阳性细胞数比HBO治疗组略增加,两组比较差异没有统计学意义(P>0.05)。
3.BrdU表达:四组大鼠海马DG区BrdU的表达均于术后4 d达到高峰,各时点HIBD对照组BrdU阳性细胞数较假手术组增加,HBO治疗组和NGF治疗组BrdU阳性细胞数均较HIBD对照组明显增加,NGF治疗组BrdU阳性细胞数增加较HBO治疗组增加更明显,各组差异均有统计学意义(P<0.01)。
结论:
1.NGF及HBO早期治疗可减轻新生鼠HIBD后神经细胞的变性、坏死;
2.新生鼠HIBD后海马DG区Nestin,BrdU的表达增加,可能与脑损伤后神经再生有关;
3.NGF及HBO早期干预治疗可增强新生HIBD鼠中枢神经系统Nestirt,BrdU的表达,对新生鼠因脑缺氧缺血所致神经细胞损伤修复中发挥一定的保护作用。