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背景与目的:肺癌作为全球范围内发病率和死亡率最高的恶性肿瘤,5年生存率极低,早期诊断和早期治疗是改善肺癌预后的关键。肺癌血清肿瘤标志物的检测是目前临床肺癌早期诊断的主要手段之一。常用的肺癌血清肿瘤标志物有:神经元特异性烯醇化酶、癌胚抗原、胃泌素释放肽前体、细胞角蛋白19片段、鳞状细胞癌抗原等,由于其敏感性和特异性较低,临床常采用几项标志物的联合诊断检测。因此,采用SELEX技术筛选肺癌血清已知和未知肿瘤标志物的核酸适配体成为目前肺癌早期诊疗的研究热点。核酸适配体是从人工构建的随机寡核苷酸文库中筛选出的与目标靶分子高亲和力、强特异性结合的寡核苷酸分子,其制备简单且成本低廉,并具有稳定性好、靶分子范围广、易于修饰、无免疫原性等诸多优点,功能类似于抗体,甚至优于抗体。因此,基于核酸适配体检测技术为肺癌的早期诊断开辟了新途径。方法:我们选取癌胚抗原特异性单克隆抗体作为筛选的目标靶分子,以羧基化琼脂磁珠作为筛选的介质,利用消减SELEX技术筛选得到该靶标的高亲和力、强特异性结合的核酸适配体。并通过转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,挑取克隆团,且采取交错PCR技术鉴定阳性克隆并测序。结果:(1)通过酶联免疫吸附测定实验对比磁珠与树脂偶联乙肝表面抗原的能力,选择经过表面修饰的羧基化琼脂磁珠作为SELEX技术筛选的介质。(2)比较了不对称PCR法和链霉亲和素磁珠分离法制备ssDNA的结果,选择链霉亲和素磁珠分离法制备ssDNA,且进一步优化该方法,提高了SELEX筛选效率。(3)通过消减SELEX技术对癌胚抗原特异性单克隆抗体进行10轮筛选,得到了与该抗体富集的寡核苷酸文库。(4)通过转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,挑取了14个转化成功的克隆团,且采取交错PCR技术鉴定阳性克隆及验证靶标与文库结合的特异性,最终得到2号阳性克隆对靶标具有强特异性吸附,并得到了测序结果。结论:癌胚抗原特异性单克隆抗体特异性核酸适配体的筛选为肺癌的早期诊疗提供了新的突破口,为肺癌血清其他已知肿瘤标志物的核酸适配体筛选奠定了实验基础。