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目的: 通过切除卵巢的方法建立大鼠骨质疏松模型,观察雌性大鼠在生长期、成年期及切除卵巢后不同时期的骨骼变化,确定建立模型的最佳时间及评价方法,同时观察骨保护素(OPG)在雌性大鼠去卵巢前后不同时期骨组织的表达变化及与相关指标的关系,探讨其在骨质疏松发病机制中的作用。方法: SD雌性大鼠随机分为生长期组(3月龄和5月龄组)、成年组(6月龄组)、去卵巢(OVX)(6月龄切除卵巢)后1月、2月、3月组和相应的假手术组(SHAM)。采用比色法测定血清碱性磷酸酶(AKP)和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)血清浓度。采用双能X线吸收法(DEXA)测定大鼠全身骨密度(BMD)和骨矿含量(BMC),大鼠在相应组龄处死后取胫骨近端进行骨组织计量学测量,即骨小梁面积百分率Tb.Ar%、骨小梁数目Tb.N、骨小梁厚度Tb.Th和骨小梁分离度Tb.Sp,免疫组化方法结合图像分析半定量分析OPG在胫骨的表达,测定平均光密度(MOD)、OPG在骨小梁中阳性表达的面积密度和OPG在松质骨骨组织阳性表达的总面积。骨密度指标与骨组织计量学指标进行相关分析,OPG阳性表达指标与AKP、TRAP和BMD进行相关分析。 结果: 1. SD雌性大鼠BMC和Tb.Th随月龄持续增加,BMC在OVX组和SHAM组差异无显著性(P> 0.05),Tb.Th在OVX组增加缓慢,术后2月差异有显著性(P < 0.05);BMD 和Tb.Ar%、Tb.N在生长期逐渐增加,成年期6月达到峰值,以后逐渐下降,OVX组下降显著,BMD 和Tb.Ar%在手术后1月与SHAM组比较差异有显著性(P < 0.05, P < 0.01),Tb.N在术后2<WP=4>月差异有显著性(P < 0.05);Tb.Sp在生长期逐渐缩小,成年后增加,OVX组术后增加显著,术后2月差异有显著性(P < 0.01)。 2. OVX组术后1月骨质疏松模型成功,BMD 和Tb.Ar% 、Tb.Th存在正相关性(r=0.4453,P < 0.01;r=0.3256,P < 0.05),与Tb.Sp 存在负相关(r=-0.2554,P < 0.05),BMC与骨组织计量学指标无相关性。3. AKP在生长期最高,TRAP在生长期最低,二者在OVX组术后均较SHAM组显著升高,AKP在术后1月差异有显著性(P < 0.05),TRAP在术后3月差异有显著性(P < 0.05)。4. OPG在骨小梁阳性面积密度和MOD随月龄逐渐增加,去卵巢后1月OVX组骨小梁阳性面积密度和MOD较SHAM组下降,MOD差异有显著性(P < 0.01),术后2月和3月有代偿增加。骨组织总OPG阳性表达面积随月龄增加,去卵巢后OVX组1、2、3月较SHAM组均显著下降(P < 0.05, P < 0.01, P < 0.01)。5. OPG骨小梁阳性面积密度与TRAP存在正相关(r=0.592,P < 0.01),MOD、骨组织总OPG阳性表达面积与BMD正相关(r=0.353, P < 0.01, r=0.298,P < 0.05)),与AKP负相关(r=-0.301,P < 0.05,r=-0.293, P < 0.05)。 结论: 1. 雌性大鼠在成年期6月龄达到峰值骨量,去卵巢后1月Tb.Ar%和BMD下降,差异具有显著性,模型成功,AKP和TRAP均较对照组显著增加,为高转换型骨质疏松,符合绝经后骨质疏松症特点,雌性大鼠6月龄为建造骨质疏松模型的最佳时间。2. 骨组织计量学与BMD均为评价骨骼状况的较好方法。3.去卵巢引起OPG骨组织表达下降,从而抑制骨吸收作用减弱是雌激素缺乏导致骨质疏松的重要原因之一,虽然机体代偿性分泌增加,但作用有限,只能在骨组织相对减少骨吸收速度,骨量仍持续丢失,OPG在骨质疏松发病机制中发挥重要作用。4. OPG与骨吸收关系密切,有望成为新的骨转换指标。