香烟暴露和戒烟大鼠支气管肺泡灌洗液及外周血调节性T细胞的表达及意义

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目的观察香烟暴露和戒烟大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)及外周血中调节性T(Treg)细胞的表达与探讨其意义。方法将50只健康清洁级雄性Wistar大鼠随机分为五组:12周正常对照组(A组)、24周正常对照组(B组)、12周吸烟组(C组)、戒烟组(D组)、24周吸烟组(E组)。用烟熏法复制大鼠气道炎症的动物模型。12周后,A组、C组处置取材;D组实行戒烟12周;E组继续烟熏12周。再次满12周后B组、D组和E组均处置取材。行病理学检查,HE染色下观察小气道病理改变,进行气道评分;收集BALF进行细胞学计数和分类;用酶联免疫吸附法(ELISA)法测出BALF中4种细胞因子的浓度: Th1/Th2型细胞因子IFN-γ、IL-4、促炎因子IL-8、TNF-α;用流式细胞术检测各组大鼠BALF及外周血中Foxp3+ Treg细胞的数量,用RT-PCR检测各组大鼠BALF及外周血中Foxp3 mRNA的表达。结果(1)与正常对照组比较,12周吸烟组、戒烟组、24周吸烟组气道炎症评分明显增高(P均<0.01)。与12周吸烟组相比,戒烟组、24周吸烟组两组气道炎症评分均增高(P均<0.01),24周吸烟组升高最明显(P均<0.01)。(2)与正常对照组相比,12周吸烟组、戒烟组、24周吸烟组BALF中IFN-γ、TNF-α和IL-8增高,IL-4减少(P均<0.01)。与12周吸烟组相比,戒烟组IFN-γ、TNF-α无明显变化(P>0.05),24周吸烟组增高最明显(P<0.01)(3)与正常对照组相比,12周吸烟组、戒烟组、24周吸烟组BALF中Foxp3+ Treg细胞比例上升(P<0.01),后三组之间BALF中Foxp3+ Treg细胞比例无明显差别(P均>0.05)。各组外周血中Foxp3+ Treg细胞比例无明显差别(P均>0.05)(4)与正常对照组相比,12周吸烟组、戒烟组、24周吸烟组BALF中Foxp3 mRNA表达升高(P<0.01)。后三者之间BALF中Foxp3 mRNA表达无明显差别(P均>0.05)。各组外周血中Foxp3 mRNA表达无明显差别(P均>0.05)。结论(1)香烟暴露致大鼠气道Th1/Tc1介导的炎症伴BALF中Treg细胞表达增高。(2)戒烟后大鼠气道炎症仍存在,但较持续香烟暴露大鼠减轻,BALF中Treg细胞表达未见下降。(3)气道内Treg细胞高表达可能与抑制气道炎症有关。
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