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目的:在整理古今文献的基础上,梳理人参平肺散的组方源流,配伍及应用特点。复制博来霉素(BLM)诱导大鼠肺纤维化模型,结合体外转化生长因子β1(TGF-β1)刺激人胚肺成纤维细胞(HELF),观察该方对肺纤维化的干预效果以及对上皮细胞-间充质转化(EMT)和自噬相关蛋白表达的影响,探究人参平肺散干预特发性肺纤维化(IPF)的潜在机制,为临床使用该方提供客观依据。方法:1.收集历代中医文献中有关人参平肺散的相关论述,梳理该方的组方源流,以《症因脉治》人参平肺散为重点,探讨其配伍及应用特点;通过整理中国知网(CNKI)、维普、万方等公开数据库中相关文献,分析人参平肺散治疗肺痹在现代肺纤维化病证治疗中的意义。2.复制BLM诱导大鼠肺纤维化模型,用不同剂量人参平肺散干预,吡非尼酮作为对照,记录体重及死亡情况,检测肺功能、肺系数、肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量,观察HE及Masson染色的肺病理,qPCR及WB法检测肺组织中EMT相关蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、钙黏蛋白E(E-cadherin)以及自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3B)、哺乳动物Atg6同源蛋白(Beclin-1)mRNA与蛋白表达。3.体外培养HELF,设立正常对照组、10 ng/mL TGF-β1处理组、TGF-p1+10 μg/mL人参平肺散组、TGF-β1+20μg/mL人参平肺散组、TGF-β1+30μg/mL人参平肺散组。MTT法检测 HELF 增殖情况,qPCR 及 WB 法检测α-SMA,E-cadherin,LC3B,Beclin-1 mRNA 与蛋白的表达水平。结果:1.本文研究的人参平肺散出自《症因脉治·痹症论》主治肺气受损,气虚上逆之肺痹。经现代文献的梳理,肺纤维化可归属于肺痹范畴,人参平肺散用于治疗气阴两伤、肺热郁闭之肺纤维化。2.人参平肺散对BLM致大鼠肺纤维化的影响:复制BLM诱导SD大鼠肺纤维化模型,药物干预后,①对存活率影响:模型组大鼠存活率为57%,人参平肺散中、高剂量组大鼠存活率为82%,低剂量组和阳性药组大鼠存活率为73%。②对肺功能影响:潮气量(TV):中剂量组升高,具有显著差异(P<0.05);阳性药组升高,具有极显著差异(P<0.01)。每分钟通气量(MV):中剂量组和阳性药组升高,具有极显著差异(P<0.01);高剂量组升高,具有显著差异(P<0.05)。③对肺泡灌洗液(BALF)中炎细胞的影响:与模型组相比,人参平肺散中、高剂量组大鼠炎性细胞数量减少,具有极显著差异(P<0.01);阳性药组减少,具有显著差异(P<0.05)。④对肺系数及HYP的影响:与模型组相比,人参平肺散低、中、高剂量组及阳性药组大鼠肺系数和HYP含量降低,具有极显著差异(P<0.01)。⑤对肺病理的影响:模型组大鼠肺泡结构完全被破坏,出现大面积实质性改变以及大量蓝色的胶原沉积。与模型组相比,各给药组大鼠肺病理损伤减轻,其中人参平肺散中、高剂量组减轻更明显。⑥对TGF-β1 mRNA和蛋白表达水平的影响:与模型组相比,人参平肺散中剂量组及阳性药组大鼠肺组织中TGF-β1 mRNA表达水平降低,具有极显著差异(P<0.01);中、高剂量组及阳性药组TGF-β1蛋白表达水平降低,具有极显著差异(P<0.01)。⑦对EMT相关基因和蛋白表达水平的影响:与模型组相比,人参平肺散中、高剂量组及阳性药组大鼠肺组织中α-SMA mRNA表达水平降低,具有显著差异(P<0.05);中剂量组α-SMA蛋白表达水平降低,具有极显著差异(P<0.01),高剂量组表达水平降低,具有显著差异(P<0.05)。人参平肺散低、中、高剂量组大鼠肺组织中E-cadherinmRNA表达水平升高,具有显著差异(P<0.05);低、中、高剂量组及阳性药组大鼠肺组织中E-cadherin蛋白表达水平升高,具有极显著差异(P<0.01)。⑧对自噬相关基因和蛋白表达的影响:与模型组相比,人参平肺散中剂量组大鼠肺组织中LC3B mRNA表达水平升高,具有极显著差异(P<0.01),高剂量组、阳性药组升高,具有显著差异(P<0.05);高剂量组及阳性药组大鼠肺组织中LC3B蛋白表达水平升高,具有显著差异(P<0.05)。人参平肺散中剂量组大鼠肺组织中Beclin-1 mRNA和蛋白表达水平升高,具有显著差异(P<0.05)。3.体外人参平肺散冻干粉溶液对TGF-β1刺激HELF的影响:与正常对照组比较,TGF-β1处理组细胞增殖明显,EMT相关蛋白α-SMA mRNA与蛋白表达水平增加,E-cadherinmRNA与蛋白表达水平降低,自噬相关蛋白LC3B、Beclin-1 mRNA与蛋白表达水平降低,与TGF-β1处理组比较,不同浓度人参平肺散冻干粉溶液处理组细胞增殖降低,同时可逆转以上各指标的改变。结论:人参平肺散可以提高由BLM诱导的肺纤维化大鼠的存活率、改善肺病理、降低肺系数、HYP等,体外可以抑制TGF-β1刺激引起的HELF增殖。其作用机制可能是通过上调自噬相关蛋白LC3B、beclin-1的表达,抑制肺上皮细胞的EMT进程,从而发挥抗肺纤维化的作用,以上结果为临床使用该方治疗肺纤维化提供科学依据。