酶是一种具有催化功能的蛋白质,几乎所有的细胞活动过程都需要酶的参与。酶在适宜的条件下能够进行高效率、高特异性和专一性的催化反应,其在传感、农药生产、制药工程以及食品工业等各个领域都有着广泛的应用。但是酶容易受到自身稳定性(变异和失活)、环境因素、制备纯化、回收利用、生产费用高等因素的影响,限制了其在工业及生活中的应用,模拟酶的出现,克服了天然酶的缺点,作为天然酶的替代者具有高效性却又有更宽泛的应用范围,因此受到科研工作者的广泛关注。水解酶是催化水解反应的一类酶的总称。本实验选择了六大酶类中的丝氨酸水解酶类作为模拟对象,以碘化乙酰硫代胆碱作为该模拟酶的催化底物,用控制变量法分别考察了模拟酶的pH值、温度、底物浓度、可重复使用性、酶的稳定性以及抑制剂对乙酰胆碱酯酶模拟物的抑制程度影响因素。天然水解酶中含有直接参与催化过程的催化基团(催化三联体)和底物结合的连接基团。因此,本实验通过将肽的催化中心(丝氨酸,谷氨酸,组氨酸)和结合位点的氨基酸色氨酸与棉纤维连接来模拟水解酶,得到模拟酶的最适条件。本实验首先将棉纤维醛基化,得到最佳的醛基化条件是氧化剂浓度在20 g/L温度是55℃的条件下反应1 h得出的氧化棉纤维的醛基含量是相对较好的),计算得出醛基化效率为1.5%。然后通过醛氨反应将小肽与棉纤维连接,得到连接效率为55%。模拟酶最佳催化条件为在碘化乙酰硫代胆碱浓度为0.683 mM,pH = 9.0,温度75℃达到最高的催化效率。得到酶的米氏常数Km=3.39 mM。此研究工作表明,设计的含有活性位点的短肽和棉纤维的组合体能够有效的模拟天然酶的活性部位,能够作为模拟酶材料。本研究期望为人造模拟酶的研究提供一些指导和帮助。