目的： 研究维甲酸所诱导的大鼠骨质疏松动物模型，观察该模型的骨组织形态计量学、骨生物力学、骨密度，骨生化指标等各种改变，并以此分析该模型的特点和导致骨质疏松的原理。研究本实验室开发的药物丹参骨宝以及其他几种防治骨质疏松的药物——雌激素、司坦唑醇等对该骨质疏松动物模型的预防作用。 方法： 3月龄未交配的SPF级雌性SD大鼠68只，随机分成8组，第一组和第二组每组10只，第三组至第八组每组8只。正常对照组每日给予羧甲基纤维素钠溶液，模型组每日分别给予维甲酸混悬液和羧甲基纤维素钠溶液，低剂量丹参骨宝组每日分别给予维甲酸混悬液和低剂量丹参骨宝，中剂量丹参骨宝组每日分别给予维甲酸和中剂量丹参骨宝，高剂量丹参骨宝组每日分别给予维甲酸和高剂量丹参骨宝，复方丹参片组每日分别给予维甲酸和复方丹参片悬浊液，雌激素组每日分别给予维甲酸和雌激素溶液，司坦唑醇组每日分别给予维甲酸和司坦唑醇混悬液。以上药物均灌胃给药，每日分为上下午两次给予不同的药物，共计给药28天。所有大鼠在处死前的第13、14天和第3、4天分别皮下注射盐酸四环素和钙黄绿素进行荧光标记。动物于实验第29天处死取材，心脏取血分离血清测其生化指标；取左侧胫骨，包埋后制作不脱钙切片和磨片，并通过半自动图像分析系统测量其骨组织形态计量学参数；取右侧股骨进行骨密度、骨生物力学、骨物理指标的测量，测量完生物力学的股骨用盐酸消化后，检测其羟脯氨酸等生化指标和钙镁等微量元素的含量。 结果： 1．维甲酸对大鼠的影响： (1)维甲酸可以降低大鼠股骨的干湿重和中点附近横断面的内外径：与正常组相比，维甲酸组的大鼠股骨的物理指标明显降低，其中大鼠股骨中点横断面的外径下降了约16％，股骨湿重降低了约24％，干重降低了约22％，且都具有十分显著的统计学意义(p<0.01)，但是由于维甲酸组大鼠的体重比正常组略低，所以维甲酸组大鼠的股骨湿重体重比和干重体重比虽然也分别降低了20％和18％，但并不具有统计学意义。 (2)维甲酸可以降低大鼠股骨的骨密度：与正常组大鼠相比，维甲酸组大鼠的股骨中点的骨密度下降了约8.2％，股骨远心端的骨密度下降了约10.2％，且都具有统计学意义(p<0.01)。 (3)维甲酸对于骨生化指标的影响不明显：以羟脯氨酸为代表的骨有机质和钙磷为代表的无机质，在维甲酸组大鼠和正常组大鼠的比较中，改变不明显，总体来说是维甲酸组大鼠骨骼有机质比正常组略有上升，无机质略有下降，但是上升和下降幅度都很小，不具有统计学上的意义。 (4)维甲酸可以降低大鼠股骨骨生物力学部分指标：与正常组相比，维甲酸组的大鼠最大载荷下降了56％，弹性载荷下降了40％，断裂载荷下降了32％，断裂应变下降了41％，弯曲能量下降了38％，具有统计学意义(p<0.01)，但是弹性模量和断裂能量吸收的改变不明显。 (5)维甲酸可以降低大鼠胫骨上段松质骨骨总面积和骨小梁总面积，但对单位面积的骨小梁数量和骨小梁厚度影响不明显：维甲酸导致大鼠骨骼的几何形状缩小，导致骨总面积的减少(约32％，p<0.01)和绝对骨小梁面积的减少(约41％，p<0.01)，但是，维甲酸对大鼠胫骨上段松质骨的单位面积骨小梁数量、骨小梁厚度、骨小梁分离度的影响不明显。所以，本次实验维甲酸所造成的骨的损害与传统定义上的骨质疏松症有一定的区别。 (6)维甲酸降低大鼠胫骨上段松质骨的骨形成率：代表骨形成的几个动态参数均有比较明显的下降，其中荧光周长标记百分数下降了57％，三组骨形成率指标的下降幅度也都超过了50％，且这几个指标的下降都具有统计学意义(p<0.01)，只有骨矿化沉积率的下降没有统计学的意义，但是，该指标也下降了约22％。 (7)维甲酸的胫骨中段皮质骨面积和百分比没有明显的变化，但是外膜的骨建造受到了抑制而骨内膜的骨重建得到了增强：大鼠胫骨中段皮质骨的静态参数方面，与正常组相比，维甲酸组的皮质骨面积有小幅度的下降而皮质骨面积百分比有小幅度的上升，但均不具有统计上的意义。在大鼠胫骨中段皮质骨动态参数方面，正常组大鼠骨外膜具有非常明显的荧光，而维甲酸组大鼠骨外膜看不到明显的荧光，正常组大鼠骨内膜看不到荧光，而维甲酸组大鼠骨内膜可以看到非常明显的荧光。这说明，维甲酸可以使生长期的大鼠的骨建造变缓甚至停止，而内膜的骨重建活动变得剧烈。 (8)维甲酸可以升高大鼠血清的碱性磷酸酶含量：与正常组相比，维甲酸组的血清碱性磷酸酶和抗酒石酸酸性磷酸酶都有不同程度的上升，其中碱性磷酸酶上升幅度为271％，具有统计学上的意义(p<0.01)，抗酒石酸酸性磷酸酶上升幅度为108％，不具有统计学意义。 2．药物对大鼠的影响： (1)丹参骨宝对维甲酸致大鼠骨质疏松的影响：中剂量丹参骨宝十分有效的升高维甲酸所导致的大鼠股骨湿重体重比的降低，其数值超过了正常组；中剂量丹参骨宝和高剂量丹参骨宝可以明显的升高维甲酸所导致的大鼠骨密度的降低，具有十分显著的统计学意义(p<0.01)，其数值也达到或超过了正常组。丹参骨宝对大鼠骨组织形态计量学、骨生物力学、等其他各项指标的影响并没有显著性差别。 (2)复方丹参片、己烯雌酚、司坦唑醇对大鼠骨骼的影响：三种药物并不能改善由维甲酸所带来的股骨物理指标、股骨密度、胫骨骨组织形态计量学、股骨生物力学等改变。 结论： 按照本次实验的方法，每天给予大鼠维甲酸70mg/kg，连续给药28天，对大鼠骨质影响的特点是：维甲酸所致大鼠骨骼的改变是以骨的几何形状缩小、骨密度降低、骨的生物力学性能降低，但骨小梁面积百分比不减少为特点的骨损害。生长期的大鼠骨骼，在维甲酸的药物作用下，减弱或停止了骨骼的向外生长，皮质骨骨外膜的骨建造变得十分缓慢，同时骨内膜的重建作用增强，导致的结果是骨骼变细、变窄、变轻，进而导致骨密度的下降和骨生物力学性能的减弱，在外力的作用下使用维甲酸的骨骼的抵抗力变弱，容易导致骨折的发生。 在本次实验中，丹参骨宝中剂量组和高剂量组对于维甲酸所致股骨远心端的骨密度起到了很好的预防作用，但复方丹参片、雌激素和司坦唑醇没有产生统计学上的预防效果。