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水稻叶色突变体在水稻功能基因组研究方面具有重要的应用价值。本研究对一个新的水稻叶色突变体yl6进行了遗传定位并对其功能进行了初步分析,得到了如下结论:
a.突变体yl6幼苗期不论在低温(20℃)还是在高温(32℃)培养条件下,与野生型相比叶色均呈现出淡黄色,表明其为一温度不敏感突变体。光合色素测定结果显示,无论在低温还是高温条件下,突变体中的光和色素含量相对与野生型均有明显的下降,并由此导致黄叶表型。此外,也表明温度对该突变体光合色素的形成无明显的影响。
b.遗传分析表明,该突变性状受一对隐性基因(yl6)所控制。利用该突变体与籼稻“培矮64S”杂交产生的F2、F3群体中分离出的608个突变体型单株作为定位群体,结合SSR和CAPS分子标记将YL6基因定位在水稻第6染色体短臂上的CAPS1和RM2353分子标记之间,其物理距离约为271kb。
c.利用生物信息学手段和定量PCR技术,初步确定LOC_Os06g02380为候选基因,测序结果显示,有1bp突变(C突变为T)。
d.组织表达分析发现YL6基因属于组成型表达基因,在幼叶中表达量最高。
e.构建了RNAi干扰载体,用基因枪轰击法转化水稻愈伤,现已得到GUS阳性转基因苗,需进一步验证。
f.构建了亚细胞定位载体,结果显示基因YL6定位于叶绿体中。
本研究发现了一个新的水稻叶绿素缺失突变基因yl6,对该基因的功能进行了初步分析,将有利于后期基因功能的深入研究,同时也有利于完善叶绿体发育机理方面的理论知识。
a.突变体yl6幼苗期不论在低温(20℃)还是在高温(32℃)培养条件下,与野生型相比叶色均呈现出淡黄色,表明其为一温度不敏感突变体。光合色素测定结果显示,无论在低温还是高温条件下,突变体中的光和色素含量相对与野生型均有明显的下降,并由此导致黄叶表型。此外,也表明温度对该突变体光合色素的形成无明显的影响。
b.遗传分析表明,该突变性状受一对隐性基因(yl6)所控制。利用该突变体与籼稻“培矮64S”杂交产生的F2、F3群体中分离出的608个突变体型单株作为定位群体,结合SSR和CAPS分子标记将YL6基因定位在水稻第6染色体短臂上的CAPS1和RM2353分子标记之间,其物理距离约为271kb。
c.利用生物信息学手段和定量PCR技术,初步确定LOC_Os06g02380为候选基因,测序结果显示,有1bp突变(C突变为T)。
d.组织表达分析发现YL6基因属于组成型表达基因,在幼叶中表达量最高。
e.构建了RNAi干扰载体,用基因枪轰击法转化水稻愈伤,现已得到GUS阳性转基因苗,需进一步验证。
f.构建了亚细胞定位载体,结果显示基因YL6定位于叶绿体中。
本研究发现了一个新的水稻叶绿素缺失突变基因yl6,对该基因的功能进行了初步分析,将有利于后期基因功能的深入研究,同时也有利于完善叶绿体发育机理方面的理论知识。