FSH是由垂体前叶促性腺激素细胞的内质网上生成的一种糖蛋白激素,它与人类及其它哺乳动物的生殖功能密切相关,获得FSH单抗对于深入研究FSH的生理功能有重要的意义。利用碳化二亚胺法制备FSH-BSA共价复合物,作为免疫原,免疫Balb/c小鼠。间接ELISA法检测抗体效价。以PEG 4000为融合剂,选用对数生长期的SP2/0骨髓瘤细胞与免疫脾细胞融合,有限稀释法筛选阳性克隆,制备单克隆抗体并进行鉴定。试验结果如下:1 FSH-BSA免疫小鼠后,抗体效价均超过1:2.5×104,且免疫小鼠无发情表现,证明FSH-BSA有强的免疫原性。2间接ELISA测定的条件为:辣根过氧化物酶标记羊抗鼠IgG (酶标二抗)最适稀释倍数为l:1 200;FSH包被抗原的浓度为10μg/mL,包被液为pH 9.6,0.05 mol/L的碳酸盐缓冲液;封闭液为1.0%的脱脂奶粉;底物液为0.1%的TMB;终止液为2 mol/L的硫酸。3在融合后第7天出现小的克隆,第12天杂交瘤细胞铺满孔底80%,用建立的间接ELISA法筛选阳性孔,克隆率为36.45%,阳性克隆率为17.71%。4筛选得到两株阳性的杂交瘤细胞,分别命名为G3F8、B4A5,间接ELISA检测腹水效价分别为1:5×104和1:104,且具有特异性。5杂交瘤细胞株经冻存和传代培养证明具有稳定分泌抗体的能力。