半个世纪以来,狼(Canis lupus)在全球范围内的种群数量严重下降,分布区也大大缩小,因而受到法律保护。同时狩猎并利用狼的产品也具有深远的文化根源,因此,频频发生盗猎和走私狼及其产品的违法事件。然而,犯罪行为被查获之后,嫌疑人为了逃避法律打击往往声称所涉动物为家犬。因此,执法上需要准确鉴别狼和家犬(C.l.familiar.s.的方法。因为家犬训化历史仅有1.5万年,没有特有的遗传突变,因而基于mtDNA的传统鉴别方法效果不佳。针对这一问题,本研究采用13个核基因组SNP标记,基于SNaPshot分型技术建立了复合扩增和分型体系,分别对97份蒙古狼(C.l.chanco)和108份家犬进行了分析,用R软件中的assignPOP程序包分析并构建鉴别体系。结果显示,有12个SNP位点分型可重复性高,在蒙古狼和家犬的频率差异大,以此构建狼-犬鉴别体系。这一体系将蒙古狼和家犬正确回判的概率在0.97±0.05至1.00±0.03之间,蒙古狼的略高于家犬。以蒙古狼(n=17)和家犬(n=18)随机样本进行盲测,正确率达100%。特异性测试表明,只有犬科的北极狐(Vulpes lagopus)和赤狐(V.vulpes)可在一些位点成功分型,而在人类和鹿科、牛科、猫科动物均不能扩增分型,对跨种,尤其是人类DNA污染耐受力强。灵敏度测试表明,最低可靠检出量为125pg总DNA。平均分析成本为60RMB/样品。以上结果表明,本研究建立的方法对鉴别蒙古狼和家犬准确可靠,灵敏度高,特异性好,成本低廉。所建立的基因频率数据库可以支持实际执法鉴定。