目的:本实验利用siRNA干扰技术沉默YAP基因的表达,观察其对HepG2细胞的生物学行为的影响,并对其机制进行探究。方法:本实验运用细胞转染法将YAP siRNA转染进入HepG2肝癌细胞。运用RT-PCR技术检测YAP mRNA的表达水平;激光共聚焦和western blotting技术检测YAP蛋白的表达水平;我们分别通过细胞形态学观察、集落形成实验、细胞划痕实验和噻唑蓝(MTT)比色实验检测siRNA沉默YAP基因表达对HepG2细胞生物学行为的影响;并采用了流式细胞术来检测HepG2细胞凋亡。结果:YAP siRNA转染后,HepG2细胞中YAP在mRNA水平和蛋白水平的表达与对照组相比均显著降低。观察细胞形态,发现siRNA沉默YAP基因表达后能使HepG2细胞皱缩变小、变圆;集落形成实验和MTT实验均显示,siRNA沉默YAP基因表达后均明显抑制HepG2细胞的生长;细胞划痕实验显示YAP基因的沉默会减缓HepG2细胞的迁移;流式细胞术的实验结果显示,对照组的细胞凋亡率显著低于YAP siRNA转染组的细胞凋亡率;Western blotting结果显示,Caspase3的表达量明显升高,Cox-2和Bcl-2的表达量显著降低,Bax的表达量则无明显变化。结论:本实验运用siRNA干扰技术,YAP siRNA的转染可以有效的降低HepG2细胞中YAP mRNA和蛋白的表达水平,能抑制HepG2细胞的细胞增殖和细胞迁移、诱导HepG2细胞的凋亡。