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以研究不定根发育的良好模式植物-绿豆为材料,本论文研究生长调节剂不同种类、不同浓度和不同施用时期对绿豆下胚轴不定根形成的影响;同时进一步探究不定根形成过程中内源激素含量的变化及生长素合成有关的两种酶活性变化,以阐明不定根形成不同时期的激素调控机理。获得了如下结果: 一不定根形成的分期 显微观察表明:绿豆插条不定根形成可分为四个时期:0-12h为诱导期,在第12h有维管束间细胞开始分裂;12-24h为起始早期;24-48h为起始晚期,在第48h,根原基已经形成;48-72h为生长分化期,在72h左右,不定根突出表皮。 二不同时期外施不同浓度生长调节剂对不定根形成的影响 (一)乙烯 乙烯利在0-5X10-5mol/L浓度范围内,处理24h,促进绿豆插条的生根,其中5X10-5mol/L效果最好;超过这一范围,就抑制生根。5X10-5mol/L乙烯利在不同时间处理绿豆插条,0-6h和18-24h的处理生根的效果比其他时间段处理好,其叶又以0-6h的效果最好;在0-6h和18-24h时间段,以2h作为间隔处理插条,发现0-2h和22-24h的生根效果更佳,说明这两个时间段是敏感时期,也说明乙烯利的作用取决于其作用时间。 ACC是乙烯合成的前体,在0-50μmol/L浓度范围处理插条,插条生根多,出根早;最佳浓度是10μmol/L,生根数是对照的1.2倍。10μmol/LACC在0-6h、6-12h、12-18h和18-24h处理绿豆插条,生根效果最好的是0-6h,其次是18-24h,这和乙烯利处理的结果一致。 AOA是ACC合酶的抑制剂,在0-100μmol/L浓度范围内处理插条24h,明显地抑制生根;随浓度增加,抑制作用增强。10μmol/L AOA处理的绿豆插条生根数是对照的60%。 AgNO3是乙烯作用的抑制剂。用100μmol/L、50μmol/L和10μmol/L AgNO3处理绿豆插条,其生根数分别为1.58、2.54和6.64,而对照为10.26。说明AgNO3抑制生根。 从上述结果可知,在0-24h(即诱导划和起始早期),乙烯促进绿豆插条生根,其中以0-6h(诱导期早期)效果最好,说明乙烯 促进生j[{与不定根发育阶段有夫。 (-二)生长素 生长素是促进生十 的敝索 SX10* mo/L IAA人 0一6h和 18.24卜处理的生根数比其他时问段处J‘【灿多,’L根数分别为门.1 和10.9,对照为5.8。表明这两个时期对1*A敏感,时期与乙烯 利处理的相同。 (三)脱落酸 低浓度的ABA抑帘不定L的形成,但当ABA浓没刀·八主10’ mol/L时,插条基部虽受到伤苦,但生根数增多;10-‘nDl几 ABA 处理的插条生根数和对照比,生根数人为增加,有较多的恨原达 己形成,但未突出表皮,“胎死腹中”。10“’mol几 ABA在不同时 问段处理,6-36h有促进生根效果,〕V!。以6-12h效卅址灯。 (四)赤霉素 和许多文献报道的一样,GA3抑制绿豆抽条的’卜u,在 m一吕一m“moW浓度范围,随浓度增力,抑制效果力强口在刁1司时 问段用10”m*几*山处理插条,都表现为抑制生根,I叫下诱 导期0-6h处理生根数比其他处理少。 (五)细胞分裂素 4PU是一种活性很高的细胞分裂素,它抑制绿豆拙条的生根, 在 10”9一10”7 i*VL范围内,随浓度增力,生力数)少,其中 10’7 moMi处理,插条不能生根。 6EA在 10”9八0”5 id几浓度范围内,促进绿豆插条的生根, 随浓度增加,促进生根效果越好。 KT在10”义10“mol几范围内,抑制绿豆插条的生根,尤以 10“二*几为甚,插条基部腐烂,无根形成:随浓度k小,抑制作 用减弱。 ZT在10”干10”6 mol/L浓度范围内抑制绿豆插条不定根的形 成,当浓度达到 10”’mol/L或以上时,插条基部受到j’“重的伤害, 无不定根形成,插条不能存活。但廷 10-‘mOI/L ZT & 0七0h内不 同时间处理绿豆插条,发现起始晚期24-30h$11 36-4211处理略微 促进生根,而其它时间段处理抑制生根,特别是诱导期0-6h和 6-12h时间段处理。 三不同调节剂相互影响 (一)IAA和乙烯 IAA是促进生根的主要激素,在不定根形成过程中起中心作 用,乙烯也促进不定根的形成。1八A和**C组合处刀W山纠果足 3 **C增加IAA的促进生根效果:**C和*OA组合处理的结果 是 ACC能部分抵消 AOA抑制生根的作川,AOA能部分3L{io ACC 促进生根的作用。 对照的绿豆下胚轴插条的内源乙烯含量在第 6h、24h和 42h 出现3个峰,外施5x106m*几1*A也同样在该3个时川产。生乙