黄荆提取物及其总生物碱对蚜虫的致毒效应研究

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黄荆(Vitex negundo Linn)属马鞭草科,黄荆属。在我国分布广泛,山东泰山野生资源非常丰富。本文以刺吸式类害虫蚜虫为对象,系统研究了黄荆杀蚜活性物质的最佳提取方法和提取溶剂,黄荆二氯甲烷种提物对三种蚜虫的生物活性,初步研究了黄荆总生物碱的提取以及对棉蚜的致毒效应。为进一步开发利用这一野生杀虫植物资源和未来仿生合成奠定基础,对害虫的可持续治理具有较大的理论和实践意义。主要研究结果如下:1.明确了黄荆杀棉蚜活性物质的最佳提取方法和提取溶剂。采用有机溶剂系列提取、超临界CO2萃取和水蒸气蒸馏三种提取方法,分别提取黄荆的种子和叶片中的活性物质。通过对棉蚜的杀虫活性测定,明确了二氯甲烷种子提取物和水蒸气蒸馏得到的叶片精油杀虫活性最高,稀释250倍,24小时校正死亡率分别达到86.98%和85.27%,超临界CO2萃取物、甲醇和石油醚的种子和叶子提取物活性较差,分别为74.69%、73.04%、65.01%、54.42%、59.63%、33.82%,结合提取率经综合分析提出黄荆二氯甲烷种提物为杀蚜活性成分的最佳提取方法。2.研究了黄荆二氯甲烷种提物及四种药剂对三种蚜虫的生物活性,明确了黄荆二氯甲烷种提物对蚜虫有明显的触杀活性和一定的驱避效应。采用浸渍法,在室内测定了黄荆二氯甲烷种提物等五种药剂对三种蚜虫的毒力,结果表明:黄荆二氯甲烷种提物对苹果黄蚜、棉蚜和桃蚜的毒力分别是氧化乐果的0.11倍、0.11倍和0.05倍,表明黄荆二氯甲烷种提物对苹果黄蚜和棉蚜有较高的毒杀活性,对桃蚜的杀虫活性差。四种化学药剂中,吡虫啉对桃蚜、棉蚜及苹果黄蚜的毒力最高,氧化乐果的毒力最低,毒力分别是氧化乐果的129.56、94.47、144.44倍,噻虫嗪与啶虫咪介于两者之间。黄荆二氯甲烷种提物对桃蚜有较高的驱避活性,驱避活性仅次于吡虫啉,前者24小时和48小时对桃蚜的驱避率分别为55.75%、39.44%,后者分别为69.89%、65.43%,其他三种药剂对桃蚜的驱避活性较低。3.明确了黄荆二氯甲烷种提物对吡虫啉的增效作用。采用毛细管点滴法测定了黄荆二氯甲烷种提物与吡虫啉混配对棉蚜的联合毒力,结果表明:黄荆二氯甲烷种提物与吡虫啉混配比例为1000:1时,共毒系数为177.45,说明黄荆二氯甲烷种提物对吡虫啉有增效作用,比例为125:1时,共毒系数为109.84,说明黄荆二氯甲烷种提物对吡虫啉有增效作用。4.从黄荆种子中提取了总生物碱,并研究了黄荆总生物碱对棉蚜的生物活性。采用酸水提取法提取黄荆中的总生物碱,黄荆甲醇种提物中总生物碱的含量高于二氯甲烷种提物。黄荆总生物碱对棉蚜有较高的触杀活性,LD50为0.4231μg/头,黄荆二氯甲烷种提物对棉蚜的LD50为0.5076μg/头,说明黄荆总生物碱是黄荆二氯甲烷种提物中重要的活性组分。黄荆总生物碱对棉蚜还有一定的拒食活性,当浓度为40mg/ml时,12h的拒食率为58.33%,24h时为45.28%,到第48h时,拒食率降到30.43%。5.用黄荆总生物碱亚至死剂量处理棉蚜,系统观察了对寿命、产仔、蜜露分泌和后代若蚜的生长发育的影响,证明黄荆总生物碱对棉蚜种群有显著的持续抑制作用。在LD30处理剂量下能当代存活棉蚜后续的存活率、蜜露分泌量;并降低后代棉蚜的存活率、体重,延长其发育历期。黄荆总生物碱处理棉蚜后,处理棉蚜前9天单雌产仔数为6.66头,而对照为15.73头,处理棉蚜第10天全部死亡,而对照棉蚜第10天的存活率仍为70%。处理后存活的蚜虫,对棉蚜蜜滴重量没有明显的影响,但能有效降低处理棉蚜的排蜜频率,处理棉蚜平均每天排蜜13.70滴/头,而对照为15.78滴/头。黄荆总生物碱对处理棉蚜第1代若蚜1龄期和4龄期较对照有一定的延长,2龄期和3龄期两者相差不大;处理的棉蚜后代第1代若蚜的死亡率为22%,而对照为18%,处理组若蚜第5天的平均体重为142μg/头,对照组为150μg/头,体重明显减轻。
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