家蚕消化液35K蛋白酶及其基因研究

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该研究对象是存在于家蚕消化液中的一种蛋白酶,它可以被家蚕自身血液中的蛋白酶抑制剂CI-8所抑制.研究该蛋白酶的酶学性质、遗传特性和碱基序列组成及氨基酸结构,探索该蛋白酶的合成、分泌机制及其在体内的作用,可为害虫防治新方法的研究提供基础理论依据.该研究用疏水性交换柱层析、分子筛柱层析及阴离子交换柱层析等进行组合,从家蚕消化液中分离纯化了一种分子量为35kDa的蛋白酶,称为35K蛋白酶.用Native-PAGE及35K蛋白酶基质特异性反应染色方法分析了60个家蚕系统,认为35K蛋白酶活性带在不同的蚕品种间存在差异,具有多型性.最后构建了35K蛋白酶的大肠杆菌表达系统,在大肠杆菌中表达了该蛋白酶.该研究从家蚕消化液分离提纯了一种新的蛋白酶,并分析了该蛋白酶的酶学性质,明确了该蛋白酶为带有糖链结构的糖蛋白,在昆虫消化液蛋白酶的研究中还未见有这方面的报道.首次分析了昆虫消化液中已经明确性质的特定蛋白酶的遗传模式,并进行了部分连锁群的连锁检索.
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