【摘 要】
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Wsc蛋白作为真菌细胞完整性(Cell Wall Integrity)信号通路中非常重要的组分,在真菌响应环境胁迫中发挥着重要的作用。黄曲霉作为一种土壤腐生真菌,是研究真菌发育以及次生代谢产物调控非常重要的模式真菌之一。目前研究表明,黄曲霉菌中最主要也是致癌性最强的次生代谢产物黄曲霉毒素的形成与外界环境信号的改变有着密切的联系,我们推测CWI通路可能参与黄曲霉毒素的合成调控。本研究通过生物信息学分
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Wsc蛋白作为真菌细胞完整性(Cell Wall Integrity)信号通路中非常重要的组分,在真菌响应环境胁迫中发挥着重要的作用。黄曲霉作为一种土壤腐生真菌,是研究真菌发育以及次生代谢产物调控非常重要的模式真菌之一。目前研究表明,黄曲霉菌中最主要也是致癌性最强的次生代谢产物黄曲霉毒素的形成与外界环境信号的改变有着密切的联系,我们推测CWI通路可能参与黄曲霉毒素的合成调控。本研究通过生物信息学分析在黄曲霉菌中鉴定到两个CWI通路上游的膜蛋白AflWsc1和AflWsc2,并且构建了相应的突变菌株。观察发现,缺失AflWsc1后黄曲霉生长减慢,孢子萌发推迟,产菌核数量降低。缺失AflWsc2后,虽然黄曲霉菌核不受影响,但是黄曲霉的生长明显受到抑制,菌丝出现膨大肿胀。观察△AflWsc2的分生孢子形成发现,其和△AflWsc1结果一样,分生孢子的形成都减少。此外,AflWsc1和AflWsc2都参与了黄曲霉毒素的合成。为了进一步研究AflWsc1和AflWsc2在CWI信号通路中的关系,本研究还构建了△AflWsc1△AfWsc2双敲突变体,相比于△AflWsc2,双敲突变体生长更慢,说明AfWsc1和AflWsc2在调控黄曲霉生长发育中存在功能冗余。胁迫实验显示,△AflWsc1和△AflWsc2对细胞壁干扰剂刚果红(CR)、荧光增白剂(CFW)和抗真菌药物卡泊芬净敏感,且功能相反,不响应氧化压,不过AflWsc1和AflWsc2似乎都参与了黄曲霉对渗透压胁迫的响应。本研究表明CWI通路上游的膜蛋白AflWsc1和AflWsc2参与调控黄曲霉无性繁殖和黄曲霉毒素的合成,而且在响应细胞壁胁迫以及低渗胁迫中发挥着重要的作用。为进一步研究黄曲霉响应外界环境信号通路,进而研发黄曲霉防控手段奠定了坚实的基础。
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