糖结合蛋白在细胞生命周期中扮演着重要的角色,参与多种细胞活动,如细胞间的粘附,细胞免疫,细胞生长,细胞识别与分化等等,在肝癌发生发展时,蛋白质和脂类分子上的糖基化都会发生异常变化最终导致糖链结构及数量的变化,此时与其相应的和这些糖链发生相互作用的糖结合蛋白也会发生变化,本实验研究分别从与糖链作用的糖结合蛋白和糖结合蛋白基因水平入手来研究LX-2细胞诱导前后糖结合蛋白及其基因水平的变化,对研究糖链与蛋白间的相互作用奠定基础。本课题中基于实验室早已建立的糖芯片技术,糖-磁粒复合物分离技术及糖结合蛋白基因芯片技术分别对LX-2细胞诱导前后糖结合蛋白及其基因进行研究,系统的研究了LX-2细胞诱导前后糖结合蛋白及其基因的变化,筛选出在肝癌发生时异常表的糖结合蛋白及其基因。实验分为两大部分：(1)首先利用糖芯片(含有41种糖链)对LX-2细胞诱导前后表达的糖结合蛋白进行初步筛选,根据芯片筛选结果,最终选择GalNAc糖链对其糖结合蛋白进行分离,并通过LC-MS/MS对LX-2细胞诱导前后异常表达的糖结合蛋白进行鉴定实验结果如下：GalNAc糖结合蛋白,在诱导前细胞蛋白中104种,诱导后蛋白中有119种,诱导前后共同鉴定79种,本实验中还对LX-2诱导前后的糖结合蛋白进行GO分析,主要从按生物学过程水平,分子功能水平,细胞组分水平三个水平进行分析。进一步了解了糖结合蛋白在机体中的功能,以期发现新的肝癌诊断物。(2)通过糖结合蛋白基因芯片对LX-2细胞诱导前后差异表达的基因进行研究,其中筛选出差异性表达的基因有23个,18个基因在激活态的HSCs细胞中上调,5个基因在激活态的HSCs细胞中下调。后续实验中对其他肝癌细胞株糖结合蛋白基因的筛选,找肝癌发生时相关糖结合蛋白基因的关系,到时把筛选的差异基因进行荧光实时定量RCR验证,以求实验结果的准确性和可靠性,以便为肿瘤诊断标志的研究打好理论基础。