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微藻是海洋中重要的初级生产力。对微藻资源的开发利用,首先要解决微藻的大规模培养问题。根据微藻的自身营养特点,可以采用自养、兼养和异养的方式来培养微藻。但自养方式培养微藻存在藻细胞密度低、培养周期长、容易被污染等缺点,而兼养或异养培养微藻就很好的解决了这些问题,利用兼养或异养方式培养微藻是微藻产业的发展方向。本研究以利用细胞融合技术获得的一株能进行兼养或异养的新型微藻Tetraselmis sp.-1为研究对象,对Tetraselmis sp.-1藻株的获得和鉴定、培养条件的优化、光照的影响、摇瓶培养动力学、气升式光生物反应器培养动力学等方面进行了研究。研究结果总结如下: 1.利用细胞化学融合法,将生长迅速的兼养微藻Tetraselmis sp.和富含EPA和DHA的自养微藻Pavlova viridis进行融合,根据两亲本藻的不同生长特性和脂肪酸组成差异,筛选出一株新的微藻;利用随机扩增多态性DNA技术(RAPD),对融合子进行鉴定,确认融合子为一株新的微藻,命名为Tetraselmis sp.-1。 2.以培养系统中细胞的生物量为考察指标,对Tetraselmis sp.-1进行兼养培养条件的研究,以SK(IA)培养基为基础,研究了不同光强、接种量、培养基主要组分(盐度、碳源、氮源)对细胞生物量的影响,初步确定Tetraselmis sp.-1的兼养培养条件为:光强为2000lx,接种量为10%,培养基盐度为3%,碳源为葡萄糖(30g/L),氮源为尿素(0.6g/L)。 3.进一步利用响应面方法对Tetraselmis sp.-1培养基进行优化研究。首先利用部分因子设计结合中心组合设计对培养基主要组分葡萄糖、尿素、磷酸二氢钠、氯化钠对藻细胞生物量的影响进行分析评价,找出主要影响因子为葡萄糖和尿素,其它因子影响不显著;随后利用最陡爬坡途径接近藻细胞得率的最大响应区域;最后利用响应面分析确定了主要影响因子的最佳浓度。在最佳培养基条件下