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维生素C(Vitamin C, VC)是水溶性维生素,化学名称为抗坏血酸。参与很多体内的生理活动,在保持和促进人体健康中起到重要的作用。由于VC本身的化学结构极不稳定,在空气中易被氧化,限制了应用范围。因此,如何增强VC的稳定性是目前国内外学者所关心的问题。研究发现.通过替换VC分子结构中C2位的氢原子可使VC对热等的稳定性大幅度地提高。作为VC衍生物,2-氧-α-D-吡哺葡萄糖基抗坏血酸(AA-2G)由于在2位上有葡萄糖掩蔽,不会发生VC的氧化反应。它在水溶液中特别稳定,本身并无直接还原性,它可被细胞膜上的酶系水解,水解产物VC则被转运到体内。本课题就AA-2G的生物转化合成进行了系统的研究。本论文以本研究室的大肠杆菌基因工程菌高产的环糊精葡萄糖苷转移酶(CGTase)为研究对象,以p-环糊精和VC作为底物,转化合成AA-2G。论文的主要研究内容和结果如下：1、对该酶转化的产物通过LCMS/MS鉴定为AA-2G,选择p-环糊精作为继续优化的底物。对于出现的中间产物AA-2Gs,通过研究最佳的水解条件是：糖化酶加酶量10U/mL,水解时间6 h。2、通过单因素实验初步确定了转化的最佳条件。在该条件的基础上,研究了加酶量对转化的影响,选择160 U作为最佳加酶量。进一步通过响应面实验对糖基抗坏血酸的转化条件进行了考察,得到最佳转化条件为：转化温度36.5℃、初始pH5.4、转化时间25 h、VC 72g/L、β-环糊精55g/L,优化后糖基抗坏血酸产量达到9.76g/L,比优化前提高了33%。3、对固定化CGTase的条件进行了考察,得到最佳的固定化条件：分子筛的吸附时间3 h,分子筛的浓度2g/L,CaCl2的钙化时间1 h,CaCl2的浓度3%,戊二醛的浓度0.01%。最佳的固定化转化条件是：pH 5.5,反应温度45℃。在最佳的固定化转化条件下AA-2G最高产量达21g/L,比游离酶提高了2.15倍。