细胞因子及异丙酚对中性粒细胞凋亡的影响

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目的:1 观察IL-6、IL-10及异丙酚对离体健康人中性粒细胞凋亡、坏死和释放髓过氧化酶(MPO)的影响;2 观察IL-6、IL-10及异丙酚对离体健康人中性粒细胞caspase-3激活的影响,以初步探讨IL-6、IL-10和异丙酚影响中性粒细胞凋亡的分子机制。 方法:选择20例健康志愿者,采取外周静脉血并分离中性粒细胞,每例分离的中性粒细胞平均分为8等份,分别给予生理盐水(对照组)、IL-6、IL-10、IL-6+IL-10、异丙酚、异丙酚的脂质溶剂intralipid、IL-6+异丙酚、IL-6+intralipid,将中性粒细胞置入二氧化碳培养箱孵育24小时后,用AO/EB染色法计算每个样本中中性粒细胞的凋亡率、坏死率,用生化方法测定每个样本培养液中MPO的活性,用配对t检验比较各组间凋亡率、死亡率和MPO的差异,用Pearson相关分析计算凋亡率、死亡率和MPO释放量之间的相关关系。 另选12例健康志愿者,采用上述同样的方法分离中性粒细胞、分组、孵育,中性粒细胞孵育18小时后,利用专用的试剂盒并用流式细胞仪检测每个样本caspase-3激活的程度,并用配对t检验进行组间比较。 结果:与对照组相比,IL-6组的中性粒细胞凋亡率显著降低(P<0.01),IL-10组、异丙酚组和intralipid组的中性粒细胞凋亡率则没有显著差异(P=0.572、0.357和0.553);IL-10和异丙酚可对抗IL-6抑制中性粒细胞凋亡的作用(中性粒细胞凋亡率:IL-6+IL-10组47.95±9.83 VS IL-6组35.80±8.59,P<0.01;IL-6+异丙酚组42.50±10.51 VS IL-6组35.80±8.59,P=0.028),而intralipid则没有类似作用。 与对照组相比,IL-6组的中性粒细胞坏死率显著增加(P=0.005),而IL-10组、异丙酚组和intralipid组的中性粒细胞坏死率则没有显著差异(P=0.323、0.273和0.485);IL-10、异丙酚和intralipid均不能够对抗IL-6导致中性粒细胞坏死的作用。 IL-6还促进中性粒细胞释放MPO(MPO值:IL-6组1.2995±0.3468 VS 对照组1.1075±0.2995,P=0.016),而IL-10组、异丙酚组和intralipid组MPO值与对照组相比没有显著差异(P值分别为0.114、0.741和0.200);IL-10可对抗IL-6促进MPO
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