【摘 要】
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目的 检测他克莫司（FK506）对氟尿嘧啶（5-FU）诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响,并对其机制进行初步探讨。方法 体外培养人肝癌细胞株SMMC-7721;应用流式细胞术检测5-FU及联合FK506
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目的 检测他克莫司（FK506）对氟尿嘧啶（5-FU）诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响,并对其机制进行初步探讨。方法 体外培养人肝癌细胞株SMMC-7721;应用流式细胞术检测5-FU及联合FK506对细胞凋亡和细胞周期的影响;TransAM NF-κB核转录因子活性检测试剂盒检测NF-κBp65活性;细胞免疫组织化学检测NF-κBp65激活后入核情况;免疫印迹分析CyclinD1表达差异;RT-PCR检测CyclinD1mRNA表达。结果5-FU可诱导肝癌细胞凋亡,其作用呈浓度依赖关系（p<0.05）;随着5-FU用药浓度的增加,S期细胞比例和细胞增殖指数也增加;5-FU可激活NF-κB而入核,CyclinD1蛋白和mRNA的表达逐渐增强。FK506预处理增强了5-FU诱导SMMC-7721细胞凋亡的作用,同时S期细胞比例和细胞增殖指数也减少;FK506预处理可抑制NF-κB入核,并可下调CyclinD1基因的表达。 结论 FK506能够协同氟尿嘧啶诱导肝癌细胞株凋亡,增强肝癌细胞株对5-FU的敏感性,这种作用可通过抑制NF-κB活性进而下调CyclinD1基因的表达导致G0/G1期停滞而实现。
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