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目的:口腔癌瘤中以鳞状细胞癌为最多见,约占80%,位列全身恶性肿瘤的第八位[1]。口腔鳞状细胞癌(简称口腔鳞癌,Oral Squamous Cell Carcinoma,OSCC)常发生在40~60岁的成人,男性多于女性。部位以舌、牙龈、颊、腭为多见[2]。OSCC常发展迅速,早期可向区域淋巴结转移,晚期可发生远处转移,严重影响患者生活质量,甚至威胁生命。口腔癌前病变(Oral Premaignant Lesions,OPL)是指发生在口腔粘膜中可能演变为癌的一种病理变化,OPL主要包括白斑(Oral leukoplakia,OLK)、口腔黏膜下纤维化(Oral Submucosal Fibrosis,OSF)和红斑(Oral erythema)等[3]。16%~62%的口腔鳞癌来源于白斑恶变[4]。尽管OSCC在治疗方面已取得了很大的进展,但是死亡率仍非常高。如何实现早期预防、早期诊断及有效治疗,是现代医学界关注的问题之一。micro RNA(miRNA)是一类稳定的短序列非编码小分子RNA,主要功能是在转录后水平参与靶基因的调控[5]。其不但可以直接作为原癌基因或者抑癌基因发挥作用,而且可以通过降解或者抑制靶信使RNA(m RNA)的翻译,从而调节癌基因或者抑癌基因的表达水平。近来研究已发现在口腔鳞癌患者中存在异常表达的miRNA,这些miRNA在口腔鳞癌的发生发展中扮演着重要的角色,同样对口腔鳞癌的临床诊断、治疗以及预后判断发挥着重要作用。这些特异性表达的miRNA有望成为新的肿瘤标记物。miRNA-222是miRNA家族中的一员,又名has-mir-222,位于X染色体的p11.3区,在多种肿瘤中表达异常。在前期研究中,我们小组已经证实miRNA-222在口腔鳞癌患者外周血中高表达。本实验将进一步研究miRNA-222在正常口腔黏膜组织、口腔白斑组织和口腔鳞癌组织中的表达及意义,为后期研究miRNA-222在口腔鳞癌中的作用机制打下基础。方法:1实验分组1.1实验组:选取河北医科大学第四医院2014年11月至2015年5月行手术切除的30例口腔鳞癌组织,其中区域淋巴结转移阳性者为15例,转移阴性者15例;男性患者17例,女性患者13例;40~60岁年龄段19例,其它年龄段11例。30例行手术切除的口腔白斑组织。样本采集后置于RNA保存液中低温贮藏。1.2对照组:取同期因良性肿瘤行手术切除者的正常口腔黏膜组织30例作为对照。样本采集后置于RNA保存液中低温贮藏。1.3纳入标准:所有组织均经病理确诊,所有患者术前均未行放疗和化疗。2实验方法2.1组织样本中总RNA的提取。2.2进行RNA浓度和纯度检测。2.3总的RNA逆转录反应合成c DNA。2.4进行q RT-PCR反应,检测miRNA-222在正常口腔粘膜组织、口腔白斑组织和口腔鳞癌组织中的表达水平。3统计学分析应用SPSS13.0 for Windows统计软件进行数据分析,计量资料以均数±标准差(x|-±SD)表示,组间均数比较采用独立样本T检验方法,多个样本均数比较采用单因素方差分析。P<0.05差异有统计学意义。结果:1.正常口腔黏膜组织、口腔白斑组织和口腔鳞癌组织中miRNA-222的相对表达量分别为0.532±0.24、0.601±0.27、2.401±0.94,三者比较差异具有统计学意义(F=99.38,P<0.05)。用LSD检验方法对其进行两两比较,正常口腔粘膜组织、口腔白斑组织比较差异无统计学意义(t=1.025,P>0.05);正常口腔黏膜组织、口腔鳞癌组织比较差异有统计学意义(t=10.54,P<0.05);口腔白斑组织、口腔鳞癌组织比较差异有统计学意义(t=10.08,P<0.05)。2.淋巴结转移阳性和阴性患者口腔鳞癌组织中miRNA-222的相对表达量分别为2.063±0.81、2.739±0.97,两者比较差异有统计学意义(t=2.079,P<0.05)。3.40~60岁年龄段和其它年龄段患者口腔鳞癌组织中miRNA-222的相对表达量分别为2.327±0.95、2.530±0.95,两者比较差异无统计学意义(t=0.564,P>0.05)。4.男性和女性患者口腔鳞癌组织中miRNA-222的相对表达量分别为2.368±0.97、2.445±0.94,两者比较差异无统计学意(t=0.052,P>0.05)。结论:1 miRNA-222在口腔鳞癌组织中高表达,提示miRNA-222可能在口腔鳞癌的发生、发展过程中发挥重要作用;2 miRNA-222在口腔白斑组织中无差异性表达,提示miRNA-222可能不参与白斑恶变的过程;3口腔鳞癌组织中miRNA-222的表达水平与淋巴结转移相关,与年龄、性别无关;提示miRNA-222可能调控口腔鳞癌的转移过程。