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杜仲是我国特有的经济和药用植物,国家二级保护植物。杜仲的特有成份杜仲胶是一种硬橡胶,耐腐蚀性强,绝缘性能极佳,可塑性好,耐压强度高。同时杜仲作为一种药用植物,具有降压、利尿、改善头晕和失眠等功效。
杜仲的主要繁殖方式有有性和无性繁殖两种。目前生产上以种子繁殖为主。但种子发芽率不高,且其实生后代个体间药用有效成分和杜仲胶含量差异显著,不利于新选育出的高药高胶型杜仲优良品种的推广。
本研究以采自杜仲优良新品种华仲1号无性系的种子、不同发育时期的胚、成年树冬季休眠的芽及当年萌发的幼嫩芽为外植体,为加快杜仲优良品种的推广,对杜仲的组织培养进行了研究。以杜仲的成熟胚为外植体,通过直接和间接器官发生途径获得了杜仲再生植株,建立了杜仲组培快速繁殖体系;并以杜仲的未成熟胚为外植体,获得了胚性愈伤组织。着重研究了各阶段的培养基配方,运用正交实验设计等方法,使用spss软件进行数据分析,结果如下:
1.直接器官发生途径:以杜仲的成熟胚为外植体,通过直接器官发生途径获得了杜仲的再生植株,诱导丛生芽时比较合适的培养基配方为:MS+BA(0.5mg/L-2.0mg/L),诱导率可达50%。丛生芽的增殖时比较合适的培养基配方为:MS+BA2.0mg/L,增殖系数可达162.5%。
2.间接器官发生途径:以杜仲的成熟胚为外植体,通过间接器官发生途径获得了杜仲再生植株,愈伤组织诱导比较合适的培养基配方为:MS+BA(2.0mg/L)+NAA(0.1-2.5 mg/L),愈伤组织诱导率为70%。愈伤组织增殖合适的培养基配方为:MS+BA(2.0mg/L)+NAA(0.5-2.5 mg/L),增殖系数达180%。丛生芽诱导比较合适的培养基配方为:MS+BA2.0mg/L,诱导率达80%。
3.胚性愈伤组织:以杜仲的未成熟胚为外植体,在胚性愈伤的诱导和增殖时,效果最好的培养基配方是:MS+BA1.0mg/L+2,4-D2.0mg/L。胚性愈伤组织成熟时,效果最好的培养基配方是:MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L。
4.生根、炼苗和移栽:生根阶段比较合适的培养基配方为:1/2MS,生根率可达80%。移栽基质为等量混合的泥炭和珍珠岩,移栽成活率达到67.7%。