中国植桑养蚕历史悠久。桑树的各个部分在传统医学上基本都可入药,历代中国药典均收载了桑叶、桑枝、桑白皮、桑椹的药用功效。东莨菪素是一种简单的香豆素化合物,存在于茄科植物东莨菪,颠茄,伞形科植物白芷等植物,具有抗真菌、抑制树木腐烂的作用,同时还具有抑制单胺氧化酶、抗炎、祛风、止痛、祛痰解痉、抗肿瘤、抗鼻咽癌9KB细胞等活性。在桑树中也发现有东莨菪素的存在,对桑树中东莨菪素的提取分离、含量筛选及体外抗菌生物活性研究具有重要意义。1桑树中东莨菪素的提取分离本研究以西南大学生物技术学院新育成的人工三倍体桑树品种嘉陵20号的叶片为材料,应用乙醇浸提的方法,采取萃取、结晶、正反向色谱层析、高压液相(HPLC)等分离手段,以硅胶、聚酰胺、大孔树脂等为分离材料对东莨菪素进行提取、分离、纯化;与标样对比TLC,根据R_f进行比对鉴定,从8kg嘉陵20号桑叶(干物)中分离得到东莨菪素23mg纯品,2不同桑树品种桑叶中东莨菪素含量的测定应用HPLC对目前生产上广泛栽植的7个种27个品种桑叶中东莨菪素的含量进行了精确测定;结果发现:(1)桑树中东莨菪素的含量差别都比较大的,其中火桑叶东莨菪素的含量最高,为164.2375μg/g,大红皮的含量最低,为25.1μg/g;(2)不同季节东莨菪素的含量也有差别,在本次实验所选材料中,冬季叶片中的含量高于夏季叶片中的含量,夏季火桑叶的含量为164.2375μg/g冬季火桑叶的含量是最高的,高达294.05μg/g,为桑叶的冬季利用提供了参考;(3)桑书不同部位东莨菪素的含量也有差别,对桑树不同部位东莨菪素的含量进行测定后比较后发现,火桑和沙二枝条中的东莨菪素含量要低于叶片中的含量,沙二叶片中东莨菪素的含量为219.275μg/g,沙二枝条中东莨菪素的含量为152.15μg/g,说明同一桑树品种桑树叶片的东莨菪素的含量要高于桑树枝条中的含量。本实验比较了桑树和亲缘关系较近的构树叶片中东莨菪素的含量,结果发现大部分桑树品种桑叶中,东莨菪素的含量明显高于构树,少部分桑树品种桑叶和构树中的东莨菪素含量接近,表明东莨菪素的含量在桑科植物中,属间的差异较大,也就是桑属植物叶片中东莨菪素的含量高于同科的构属植物,这为桑属植物开发提取东莨菪素提供了实验依据。3东莨菪素体外抗菌活性研究本研究应用琼脂扩散法和琼脂稀释法,初步对从桑树中提取分离的东莨菪素,进行了体外抗细菌和抗真菌的活性测定,两种方法测定结果一致。结果表明,从桑树中分离提取的东莨菪素对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌没有明显的抑制作用,但是东莨菪素对绿脓杆菌和枯草芽孢杆菌有一定的抑制作用,对绿脓杆菌的最小抑制浓度在62.5μg/mL-125μg/mL之间,对枯草芽孢杆菌的最小抑制浓度在125μg/mL-250μg/mL之间。不同抑菌浓度之间存在显著差异,并且随着东莨菪素药液浓度的增加,抑制作用也随之增强;东莨菪素对假丝酵母具有一定的抑制作用,并且和浓度梯度呈现正相关关系,和时间也有关系,最佳抑制浓度为500-1000μg/mL最佳抑制时间为48小时。