[目的]探讨金纳米颗粒(AuNPs)对宫颈鳞癌细胞株C33A的放疗增敏效应:初步探讨靶向性放疗增敏的作用,以及对细胞周期及细胞凋亡的影响。[方法]1.柠檬酸三钠还原四氯金酸法制备粒径约为20nm的AuNPs。2.使用马尔文粒度仪、透射电子显微镜(TEM)、场发射扫描电子显微镜(FESEM)、紫外分光光度仪(UV-Vis)等检测AuNPs的粒径、分布状态、有无聚集等相关理化性质。用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-AES)检测柠檬酸三钠还原法制备出的AuNPs的回收率。3.选择人宫颈鳞癌细胞株C33A作为本实验的实验对象进行体外研究。3.1采用噻唑蓝MTT法检测不同浓度的AuNPs对细胞株C33A的存活率的影响。3.2不同浓度无血清AuNPs培养基培养C33A细胞,用荧光倒置显微镜观察金纳米颗粒在细胞内沉积状况,选择合适的浓度培养宫颈鳞癌细胞株C33A。现实验选择的AuNPs不同浓度分别为1nM、2nM、4nM、8nM、16nM。3.3 Annexin-V/PI流式细胞仪检测细胞的周期和细胞的凋亡。实验分4组,对照组、单纯AuNPs孵育组、单纯照射组以及AuNPs+照射组。不同放射剂量(2Gy、4Gy、8Gy,16Gy)照射细胞后分析凋亡流式检测图。[结果]1.成功制备出粒径约为20nm,均匀分布、密集度良好、无明显聚集的、吸收峰在520左右且峰形较好的球形金纳米颗粒。平均回收率为90.94%。2.不同浓度无血清AuNPs培养基培养宫颈鳞癌细胞株C33A,MTT法检测细胞存活率分别为99.4±0.45%、97.8±1.24%、98.3±0.75%、97.9±1.29%、97.5±1.058%,宫颈鳞癌细胞株C33A存活率无明显差异,AuNPs对细胞株C33A无明显细胞毒性。根据荧光倒置显微镜的结果确定以终浓度为4nM的无血清AuNPs培养基培养宫颈癌细胞株C33A做后续实验。3.终浓度为4nM的无血清培养基孵育宫颈鳞癌细胞株C33A。PI染色后,流式细胞仪检测细胞周期结果示:处于G0/G1期的细胞,对照组为64.40±0.58%而金纳米组为58.40±0.65%;处于S期的细胞,对照组为21.87±0.32%而金纳米组为20.04±0.48%;处于G2/M期的细胞,对照组为11.89±0.27%而金纳米组为20.43±0.76%。处于射线敏感期的G2/M期细胞比值明显升高。4.不同照射(2Gy、4Gy、8Gy,16Gy)剂量照射C33A细胞,空白组和对照组细胞凋亡率无明显改变。X线组与AuNPs+X线组对比可见,不同放射剂量下,AuNPs颗粒均可以明显增强放疗的效应,4Gy组与8Gy组放疗增敏的效果最显著,16Gy组放疗增敏疗效稍有减少。[结论]1.本实验成功制备金纳米颗粒,均匀分布,无明显聚集,回收率高。2.金纳米颗粒对宫颈鳞癌细胞株C33A无明显细胞毒性。3.金纳米颗粒可以调整细胞周期,促进放疗疗效。