基于滤膜SERS技术的甲状腺肿瘤患者血浆拉曼光谱研究

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表面增强拉曼光谱技术(SERS)是一种分子水平的检测技术,能对物质分子进行高灵敏和特异性的检测,提供物质分子的“指纹信息”。其已成为物品鉴定和分子检测的重要技术之一,拉曼光谱技术已被广泛应用于生命科学领域研究,将SERS技术应用于临床医学的疾病诊断,有望克服常规拉曼检测信号弱的不足,获得高信噪比的增强拉曼光谱信号,提高其在医学领域的疾病诊断灵敏度和特异性。本论文以甲状腺肿瘤的良恶性区分鉴别为检测目标,提出一种基于滤膜SERS技术的拉曼检测方法,开展基于甲状腺肿瘤患者血浆的检测分析,并结合高效的光谱数据处理,尝试发展一种面向甲状腺肿瘤区分,乃至肿瘤早期的非侵入性、快速、客观的拉曼光谱诊断方法。本论文的主要研究内容包括:1.首先简要介绍了常规拉曼散射与表面增强拉曼光谱散射(SERS)技术原理,其次概述了SERS光谱技术应用于人体血液的检测研究进展,最后对SERS光谱技术应用于甲状腺相关疾病检测现状进行了综述。本论文主要利用SERS技术对临床医学上难以鉴别诊断的甲状腺良恶性肿瘤开展初步研究。2.基于SERS技术常规血液检测,我们开展SERS光谱信号的全面优化。(1)SERS增强基底银胶的制备;(2)共聚焦拉曼显微光谱仪参数设置优化;(3)银胶与待测物不同比例混合的检测优化。基于以上各类参数的优化,我们获得了重现性更好,更稳定的SERS光谱信号,为后续SERS光谱检测研究的顺利开展奠定基础。3.我们提出了基于滤膜SERS技术的甲状腺血浆检测方法。即结合不同过滤尺寸的过滤膜,滤除血浆中部分大分子的蛋白质,对血浆样品进行预处理,比较不同滤膜处理后滤液的SERS光谱,同时获得102例甲状腺肿瘤患者血浆(70例甲状腺癌和32例甲状腺良性肿瘤)的SERS检测光谱数据。4.对获得的甲状腺血浆SERS光谱数据进行多元统计分析处理,即SERS光谱数据扣除背景后,未归一化和归一化方法(不同归一化处理)比较,以及SERS光谱数据一阶导数处理,分别采用PCA-LDA和Lasso-PLS-DA等方法深入分析比较甲状腺良性肿瘤和甲状腺癌的区分诊断效果。
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