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绞股蓝[Gynostemma pentaphyllum (Thunb) Makino,GP]为葫芦科绞股蓝属植物,具有多种功效,如益气、安神、抗衰老、抗肿瘤等。本团队前期研究发现绞股蓝皂苷类成分在抗肝纤维化方面具有显著作用。本文拟对不同产地绞股蓝药材的指纹图谱、绞股蓝总皂苷的提取纯化工艺、总皂苷部位中主要成分的含量测定方法等进行系统研究,并对动物口服绞股蓝总皂苷后的体内代谢产物进行初步分析鉴定,为研究开发现代中药奠定基础。取得以下主要结果:1.通过指纹图谱研究,确定绞股蓝药材产地,建立了十批不同产地绞股蓝药材的指纹图谱。以绞股蓝皂苷A为指标性成分,通过相似度软件计算药材的整体相似度,其中样品S3、S6的相似度大于0.99;S1、S4、S5、S7、S8、S9、S10的相似度大于0.94;只有S2的相似度低于0.9。结合相似度结果分析、主成分含量以及药材成本等方面综合考虑,确定陕西安康为研究和将来生产用的绞股蓝药材产地。2.确定从药材中提取纯化绞股蓝总皂苷的方法。通过溶剂筛选、正交试验等方法考察,最终确定了绞股蓝总皂苷的提取工艺为40%乙醇回流提取3次,提取时间1.511,液料比为6:1。获得绞股蓝总皂苷粗提物后,经大孔树脂分离纯化,得到精制绞股蓝总皂苷。3.建立了绞股蓝总皂苷中两种主要有效成分的HPLC-ELSD含量测定方法。绞股蓝皂苷XLIX线性方程为y=1.5489x+5.4436(R=0.9997),方法精密度的RSD值为0.49%,稳定性的RSD值为0.89%,重复性的RSD值为1.13%,平均加样回收率为97.48%,RSD值为1.17%。绞股蓝皂苷A线性方程为y=1.7578x+4.8426(R=0.9996),方法精密度的RSD值为0.44%,稳定性的RSD值为0.93%,重复性的RSD值为1.23%,平均加样回收率为97.85%,RSD值为1.03%。数据结果表明所建立的含量测定方法稳定可靠。通过对三批实验室自制的绞股蓝总皂苷样品的实际含量测定,进一步验证了方法的合理性和可行性。4.动物口服绞股蓝总皂苷的体内代谢产物初步分析。采用LC-Q/TOF-MS/MS技术,对大鼠口服绞股蓝总皂苷后的门静脉血、腹主动脉血及尿中的体内成分(包括原形成分和代谢产物)进行了初步的分析鉴定。在含药血液和尿液中均能检测到两个主要有效成分绞股蓝皂苷XL1X和绞股蓝皂苷A,同时在尿液中检到6个代谢产物。表明这两种绞股蓝皂苷成分可以吸收入血,为我们选取这两个化合物作为质量控制的指标提供了更加可靠的科学依据。